中国河南汉族人fe基因与血清铁指标调查.pdfVIP

中国河南汉族人HFE基因及血清铁指标调查 研究生 宋丽丽 导师 刘玉峰 郑州大学第一附属医院 儿内科 郑州450052 摘 要 研究背景遗传性血色病(hereditary 代谢疾病。发病遍及全球，以白种人发病较多，北欧人群发病率可商达l／200。 大约l／lO的白色人种是HFE基因突变携带者。HH主要特征为小肠铁吸收过量， 逐渐在肝、心、胰和其它内分泌器官的实质细胞沉积，造成器官功能障碍、肝硬 化、心力衰竭、糖尿病、垂体功能减退和关节疾病等。早期诊治可以阻止其各种 并发症的发生。HH诊断后未经治疗，其lO年生存率为60／0,经静脉放血治疗后， 其lO年生产率可提高至70％。近年来国外学者发现HFE基因突变是引起HH的 重要原因。HFE基因突变的主要形式为：C282Y突变：即核酸水平上第845位 的HH病人都可检测到C282Y突变，它是一个比较好的HH识别标记。HFE基 因突变在不同种族间差别较大。据报道。在美国密歇根州高加索人种(白种人) 调查中C282Y等位基因突变频率约为5．7％，H63D等位基因突变频率约为 14．O％。在亚洲人种如台湾、香港、日本、韩国人群调查中未发现C282Y突变， 调查报道。 研究目的一、调查中国河南汉族人HFE基因C282Y和H63D突变情况， 了解我国河南HFE基因突变的发生频率及相关基因突变类型，为HH的早期发现、 早期诊断和早期治疗提供遗传学筛查方法。二、了解HFE基因C282Y和H63D 突变与机体铁超载的关系。 对象 血液标本：河南省成年健康汉族人血液标本600份，由河南省中心血站提供。 经郑州大学第一附属医院检验科对以上600份标本进行肝功能、血常规检 测，排除了不经分析就能影响血清铁指标的情况，如谷丙转氨酶(ALT)、谷草 白细胞(WBC)异常。 本实验排除82例异常标本，对518例健康献血人群血样本进行分析。其中 岁。所有受试者无心血管、肝脏、肾脏及内分泌紊乱引起的临床及生化表现。 方法 液标本5ml，离心并分装血清，用于检测血清铁指标。 文献设计引物，进行两个区域的PCR基因扩增，利用2％的琼脂糖进行电泳，紫 外透射分析仪观察。选取扩增特异性良好的PCR样本分别进行RsaI(C282Y)和 Mbo I(H63D)限制性内切酶酶切，反应物利用2％的琼脂糖进行电泳。应用凝胶 成像系统进行成像处理。 2．铁指标测定：利用铁试剂盒和总铁结合力试剂盒及人血清铁蛋白酶联免 疫定量检测试剂盒同时测定518个样本的血清铁浓度、总铁结合力和铁蛋白。血 清铁除以总铁结合力乘以100％得到转铁蛋白饱和度(transferrinsaturation,TS)。 结果 测中，发现22个杂合突变，余496个为正常纯合子。H63D杂合基因突变频率 为4．2％，等位基因突变频率为2．1％。利用两样本率的U检验方法比较河南汉族 人与高加索人C282Y和H63D基因突变频率的差别。经统计学分析，二者差异 具有统计学意义俾O．05)。 2．血清铁指标测定：在518个中国河南汉族人样本中，男性平均年龄29．52 Ⅱ 值(+SD)为l 51 ng／m1)。利用成组设计资料的U检验方法比较二者的差异。经统计学分析，二 均高于女性(37．3±13．996)和(91±53 ng／m1)，在年龄与Ts和sF之间，无论 男性，还是女性都无明显相关性。 突变组与未突变组铁指标的差别。经统计学分析，差异无统计学意义(PO．05)。 结论 1、删的危害性大、无创性的HFE基因检测的诊断方法简单、实用，本试验 通过对中国河南汉族人HFEC282Y和H63D基因突变频率调查，为开展新生儿期 遗传筛查提供了方法：为H}l患者的早期诊断、早期治疗和早期预防开辟了道路。 2、中国河南汉族入HFE基因突变频率低于欧洲、北美洲自种人，这种HFE 基因突变频率的差异可能是中国人遗传性血色病发病率低于欧洲、北美白种人的 原因之一。 3、单纯H63D杂合突变不引起Ts和sF的增高，不会引起遗传性血色病的发 生。中国河南汉族人TS和sF