光动力联合放射shee和sheec细胞系作用的实验研究.pdfVIP

摘 要 论文题目：光动力联合放射对 SHEE 和 SHEEC 细胞作用的实验研 究 专 业：肿瘤学 研 究 生：曲智锋 指导教师：冯笑山 教授 摘 要 目的 对比观察 Photofrin Ⅱ在同源食管上皮细胞系永生化细胞 SHEE 和恶 性转化细胞 SHEEC 中吸收和排泄规律的差异，并观察放射和光动力两种处理因 素以及两者联合对两种细胞抑制作用的差异，从而揭示排除了血管、免疫等复杂 体内环境因素后，光动力杀伤肿瘤细胞的规律，并初步探索光动力与放射联合杀 伤肿瘤细胞的效果，为食管癌的治疗提示新的途径。 方法 应用紫外分光光度仪测定各种细胞培养用液吸收光谱，确定 630nm 波 长激光的透过率，从而决定靶细胞实际接受光照的能量；应用荧光分光光度仪对 Photofrin Ⅱ进行荧光光谱分析，同时测定SHEE 和SHEEC 细胞在相同浓度和时 间点对Photofrin Ⅱ的吸收和排泄情况；用CCK-8 检测放射和光动力两种手段， 以及两者联合应用对SHEE 和SHEEC 细胞的抑制作用。 结果 本实验所用的 630nm 波长的激光能完全透过M199 培养液、M199 完 全培养液、PBS 液；Photofrin Ⅱ激发波长在 229nm 、280nm 、395nm 等波长 处，其中395nm 波长光可激发Photofrin Ⅱ在634nm 处发射荧光； Photofrin Ⅱ 孵育 150 分钟后，SHEE 和 SHEEC 细胞对其吸收达到高峰，随后进入平台期； SHEE 和SHEEC 细胞对Photofrin Ⅱ的吸收在一定浓度范围内随着孵育浓度的增 加有所增加；Photofrin Ⅱ孵育 150 分钟后，更换为不含 Photofrin Ⅱ的 M199 液，在换液 15min 内，SHEE 和 SHEEC 细胞内 Photofrin Ⅱ的含量变化较小， 15min 后迅速下降；在 15 μg/ml Photofrin Ⅱ浓度条件下，光动力对 SHEE 和 SHEEC 细胞的抑制作用随功率密度和照射时间的增大而增大，抑制率最高均能 达到95%左右，且 SHEE 细胞的抑制作用明显高于 SHEEC 细胞；光动力和放射 对 SHEE 和 SHEEC 细胞有明显抑制作用，200cGy 放射后 24h 抑制率分别为 2 17.42%，11.95%，有统计学差异 （P ＜0.05 ）；50mw/cm 功率密度下，光动力照 射 20Sec 后 24h 抑制率分别为 32.5% ，19.18%，有统计学差异 （P ＜0.05 ）；放 射前应用光动力两者抑制率显著增加，分别为 33.46% ，23.31%，与单纯放射和 光动力处理组相比均有显著的统计学差异 （P ＜0.05 ），放射后应用光动力较单 I 摘要 纯光动力细胞抑制率无明显增加。 结论 SHEE 和 SHEEC 细胞株对光敏剂 Photofrin Ⅱ的吸收和排泄能力无明 显差别，PDT 在体体外对不同细胞的杀伤效应的差异可能与细胞对 Photofrin Ⅱ 吸收和排泄方面的因素无明显关系；PDT 和放射联合应用对SHEE 和SHEEC 细 胞的抑制作用比单纯应用两种手段增强，提示两种治疗手段联合应用可提高细胞 抑制率，可能成为较为有效的治疗食管癌的联合治疗方案，具体联合方案有待于 进一步临床研究。 关 键 词：食管癌，光动力治疗，放射治疗，Photofrin Ⅱ，SHEE，SHEEC 论文类型：应用基础研究