DNA的分离、提取和纯化技术WL资料.pptVIP

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  • 2017-08-21 发布于湖北
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DNA的分离、提取和纯化技术WL资料.ppt

DNA的分离、提取和纯化技术 营养与食品卫生学专业 王 亮 DNA的理化性质及特点 一 物理性质 1、形态 DNA为白色纤维状固体(通常溶于TE缓冲液或水)。 2、溶解性 溶于水,不溶于乙醇、乙醚和氯仿等一般的有机溶剂;DNA在水中呈粘性胶体溶液。在酸性溶液中DNA易水解,在中性或弱碱性溶液中较稳定。 核酸既含有酸性的基团,又含有弱碱性的基团,故可发生两性解离。其解离状态随溶液的pH值而改变。 3、两性解离 利用核酸的两性解离可以通过调节核酸溶液的等电点来沉淀核酸,也可通过电泳分离纯化核酸。 嘌呤和嘧啶具有共轭双键,能强烈吸收紫外光。在紫外区260nm和280nm处有强的吸收峰 。在260nm紫外线下,1OD(光密度值)相当于双链DNA浓度为50μg/ml;单链DNA为40μg/ml。因此可根据核酸溶液的OD值,计算核酸样品的浓度或含量。对于纯的DNA,可以通过A260/ A280值来判断其纯度。 纯的DNA:A260/ A280 =1.8 二 紫外吸收性质 DNA的特点 (1)DNA(或RNA)是水溶性的。 (2)嘌呤碱和嘧啶碱分子中都含有共轭双键体系 (3)从核酸的分子结构上看,核酸是两性电离,既带正电荷, 又带负电荷。 (4)DNA在细胞中存在部位不同(细胞核、线粒体、质粒)。 (5)DNA空间构象不同,电泳时

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