raav-vef165基因与mscs联合治疗对血管新生的影响.pdf

中 文 摘 要 adenoassociated 目的以腺相关病毒(recombinant virus，rAAV)介导的血管内皮细 endothelial 胞生长因子165基因载俸(vasculargrowth stem 干细胞(mesenchymal MSCs联合VEGFl65基因移植对肢体缺血的治疗效果。方法王．利用全骨髓培养法提 取培养MSCs，绘制原代及第三代细胞生长曲线，利用免疫组化法检测表面标志物CD34、 CD44；剩忍流式缨胞术检测表磷标志物CD900 后，利用ELISA及PCR检测VEGFl65基因的表达，并绘制生长曲线o3．以近交系大鼠 转染VEGFl65基因的MSCs，移植6周后通过Ⅷ因子染色检测新生血管密度。结果1． 显高于未转染组(PO．05)，且5d时达到高峰，此后表达开始下降oPCR：琼脂糖凝胶电 转染进MSCs细胞中。转染后的生长曲线及细胞形态较未转染组无明显变化，表明 VEGFl65基因转染对MSCs生长冤明显影响o3．硼因子染色示D组动物缺血区毛细血 关键词 血管内皮生长因子165骨髓闯充质予缨胞斑管新生腺相关病毒 of StemCells TransplantationMesenchymal TransfectedwithVascularEndothelial GrowthFactorGeneintoRatischemicskeletalmuscle Abstract To evaluatethe effectofthebonemarrow stemceils Objective angiogenic mesenchymal withhumanvascularendothelialfactorl adeno (MSCs)transfected growth 65(VEGFl65)of ～associatedvires todetectthe and ofVEGFl vector，and expressionbioactivity 65inthe todetectthe and of ontheareaofisehemic MSCs，Then expressionbioactivity skeletal gene muscleinrats．Methods1．The cultureofbonemarrow whole extractionofMSCs culture， Drawnthe andthethird ofcell detect pfimmy generationsgrowth the onthesurfaceCD34and CD90．2．rAAV—VEGFl65trans— signs CD44，Flow—testing fectedinthe andPCRdetectthe ofVEGFl MSCs，ELISA expression 65。Drawnthecell animalm