shp-2基因硼替佐米对淋巴瘤细胞增殖抑制及诱导凋亡中的作用.pdf

目 录 中文摘要……………………………………………………………………l 英义摘要……………………………………………………………………4 研究论文SHP一2基因在硼替佐米对淋巴瘤细胞增殖抑制及诱导凋亡 中的作用 前言·，……………………··………………………………………··…8 丹|J舌”……………………一………………………………………一…8 材料与方法……………………………………………………………9 结果……………………………………………………………………13 附图………………………·………………………………………··…16 附表……………………………………………………………………19 OOOOO……·…………………………………………··22 讨{仑……………O 结论………………………·…………………………………………··26 参考文献………………………………………………………………28 致调}…………………………………………………………………………43 个人简历……………………………………………………………………44 中文摘要 SHP-2基因在硼替佐米对淋巴瘤细胞增殖抑制及诱导凋亡中的 作用 摘 要 目的：淋巴瘤起源于淋巴结和淋巴组织，其发生大多与免疫应答过程 中淋巴细胞增殖分化产生的某种免疫细胞恶变有关，是免疫系统的恶性肿 应，但多数往往在达到缓解后数月至数年内出现复发。寻求治疗新药及新 方案成了当前的一个紧迫问题。体外和动物实验显示蛋白酶体抑制剂硼替 佐米对包括多发性骨髓瘤、结肠癌、慢性淋巴细胞白血病及胰腺癌在内的 许多恶性肿瘤有抗癌活性，并具有明显的抗淋巴瘤作用，其作用机制涉及 特异性地抑制泛素一蛋白酶体通路，从而发挥阻止肿瘤细胞生长、播散及 血管生成的作用，其毒副作用小，与常规化疗药物无交叉耐药性。国外基 础研究显示硼替佐米体外单药及联合其他药物等均可以抑制多种恶性淋 巴瘤细胞株的增殖。 白磷酸酶。SHP．2通过SH2功能域结合到酪氨酸磷酸蛋白酶，使其自身结 构中的PTP酶激活，从而作为下游信号分子参与信号转导、调节细胞增殖、 分化、迁移、死亡，是细胞因子、抗原、细胞外基质等的下游信号分子。 本实验从细胞生长增殖、凋亡及凋亡相关蛋白表达等细胞生物学行为 的角度，探讨硼替佐米对淋巴瘤细胞株Raji细胞、Jurkat细胞的影响及 SHP一2在此过程所起作用，为临床寻找新的治疗药物提供理论依据。 养，用不同浓度的硼替佐米对其进行处理，二r不同时段收取细胞，观察细 胞的增殖抑制率及凋亡率，用实时定量PCR的方法检测实验组与对照组 SHP一2基因fIJmRNA的表达水平。 结果： 1．随着删替佐米浓度、干预时间增力¨，．1urkat细胞、Raji纠lJj包增殖均 有明湿的抑制作用，仃存明显的剂量依赖性和刚’问依赖性。 2．|箍着删臀佐米浓度增力¨，二F预时问增加，jurkat纠胞株、Raji细 中文摘要 胞株凋亡率增加，存在明显的剂量依赖性和时间依赖性。 3．硼替佐米干预组SHP2$H对表达水平高于未加药物组，未加药物干预 不同，P(0．05，有统计学意义。 4．当硼替佐米作用于Jurkat细胞株时，随着药物作用时间的延长， 表达水平与未干预组比较无明显变化，P0．05，无统计学意义。硼替佐米 与未干预组比较无明显变化P0．05，无统计学意义；随着时间延长，药物 与24h有明显差别，PO．05，有统计学意义。 5．当硼替佐米作用于Raji细胞株时，随着药物作用时间的延长， 表达水平与未干预组比较无明显变化，P)0．05，无统计学意义。硼替佐米 预组比较无明显变化P0．05，无统计学意义；随着时间延长，药物干预36h 时间延长，SHP2表达水平与未干预组比较有差别，P(0．05，有统计学意义； 且36h后SHP2表达水平与24h有明显差别，P0．05，有统计学意义。 水平升高。经两两比较，有统计学意义(p0．05)； 7．在．】urkat细J抱株和Ra．