亚砷酸钠对胰岛细胞胰岛素合成与分泌的影响.pdfVIP

摘 要 目的：观察亚砷酸钠（NaAsO ）对胰岛 β细胞 NIT-1 胰岛素（Insulin ）合成与分泌的影响。并进一 2 步探讨其可能的作用机制。 方法：体外培养NIT-1细胞，不同浓度的NaAsO2 （0，1，2 ，4 ，8，16和 32μmol/L ）作用不同时间 （24h和48h ）后，采用MTT法检测细胞的增殖活性。根据MTT结果选择合适浓度的NaAsO2 （0，1， 4和8μmol/L ）作用细胞不同时间（24h和48h ）后，用酶联免疫法（ELISA ）测定不同浓度葡萄糖（5.5， 16.5 mmol/L）刺激的Insulin分泌情况；RT-PCR方法检测Insulin mRNA 的表达；AnnexinV/PI双染色 法流式细胞仪检测各组细胞凋亡；激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内活性氧（ROS ）的变化。 NaAsO2 （0，4 ，8μmol/L ）作用细胞48h后，荧光免疫组织化学方法检测细胞中胰岛-十二指肠同源域 蛋白（PDX-1 ）的易位情况；Western-blot