戊四氮点燃癫痫鼠学习记忆改变与海马神经颗粒素的表达变化.pdf

中文摘要 戊四氮点燃癫痫大鼠学习记忆改变与海马神经颗粒 素的表达变化 摘 要 目的：癫痫是一种脑部疾患，其特点是持续存在能产生 癫痫发作的脑部持久性改变，并出现相应的神经生物学、认 知、心理学以及社会学等方面的后果。癫痫患者除癫痫发作 外，常伴有注意力分散、学习记忆能力减退等认知功能受损 的表现，其中学习记忆能力减退是癫痫患者认知障碍中最常 见的症状。约有30％癫痫患者有认知功能损害，20％-25 ％的患者有明显障碍。严重者可影响工作、学习和生活质量， 并给家庭和社会带来沉重负担。认知功能障碍已成为癫痫防 PTZ)建立更加类似临床发作的慢性癫痫大鼠模型来观察慢 性点燃癫痫大鼠学习记忆能力的改变，并运用反转录多聚酶 Blot以及免疫组织化学等方法观 链反应(RT-PCR)、Western Ng在癫痫大鼠学习记忆障碍中的作用，为进一步研究癫痫 认知功能障碍的机制奠定基础。 方法：采用戊四氮腹腔注射慢性点燃癫痫(chronic h光亮／黑暗条件、22℃～25℃环境温度，分笼喂养。随机分 为两组：慢性癫痫发作缍[(chronicepileptic control 只，正常对照组(normal 中文摘要 大鼠每日晨8：00--9：00腹腔注射PTZ35mg／kg，连续30天， 每天注射完毕后观察1小时。NC组大鼠给予同等剂量、同 等次数的生理盐水。依据Racine分级标准将大鼠行为分为6 级。O级：无任何反应；I级：胡须动、面肌抽动；II级： 点头、咀嚼或湿狗样抖动(wet dog 前肢抬起、阵挛；Ⅳ级：站立伴有双侧前肢阵挛；V级：跌 倒、全身强直阵挛性发作。完全点燃的标准是获得连续3次 Ⅳ级或以上的运动惊厥。实验第31天起选取完全点燃的CEP 组和NC组大鼠各l6只分别行Morris水迷宫和Y迷宫检 测，测定大鼠学习记忆能力，记录大鼠在Morris水迷宫中的 逃避潜伏期、穿越平台次数及在平台象限的时间，记录在Y 迷宫中的错误反应次数及全天总反应时间，然后各组大鼠均 mRNA和蛋白的水平变化， Blot方法分别测定大鼠海马Ng 用免疫组织化学方法观察Ng在海马CAl区、CA3区的表达 情况。 结果：1动物模型制备CEP组大鼠在连续注射第6～ 10天起开始出现凝视、点头、反复洗脸动作、面部及头部抽 搐等，以后发作症状逐日加重，于给药第1824天全部出现 全身肌阵挛、双前肢抬起，最终发生全身强直．阵挛性发作， 伴有跌倒、翻滚及流涎，达到RacineIV～V级的点燃标准，继 续给药至30天。NC组动物均无癫痫发作表现。 2 实验：CEP组大鼠第1天逃避潜伏期与NC组比较差异无统 中文摘要 越平台区域的次数明显低于NC组(P0．01)，在平台所在象限 宫检测结果：CEP组与NC组比较大鼠的错误反应次数增多 (P0．05)，但全天总反应时间，两组之间比较差异无统计 学意义(PO．05)。 3大鼠海马Ng O．61±0．17低于NC组0．91±0．23(PO．05)。 4 物呈棕褐色，主要位于海马CAl区、CA3区的锥体细胞层 神经元的胞浆中。在CAl区CEP组Ng的免疫反应强度较 结论：1戊四氮慢性点燃癫痫大鼠学习记忆能力受损， 主要表现为Morris水迷宫中逃避潜伏期延长，平台穿越次数 减少以及Y迷宫中错误反应次数增加。 2与对照组比较，戊四氮慢性点燃癫痫组大鼠海马神经 颗粒素mRNA转录水平下降，蛋白表达减少，在海马CAl 区免疫反应减弱。海马Ng表达减少可能参与了癫痫所致学 习记忆障碍。 关键词：戊四氮；癫痫；海马；学习记忆；神经颗粒素 荚文摘要 of in of