交大近代仪器分析第二三章光学概论和紫外法资料.pptVIP

第三章 紫外分光光度法 紫外分光光度法及其仪器 紫外分光光度法基本概念 紫外分光光度法定量方法及其计算 紫外分光光度法在医药学中的应用 续前 讨论： 1．Lamber-Beer定律的适用条件（前提） a. 入射光为单色光 b. 溶液是稀溶液 2．该定律适用于固体、液体和气体样品 3．在同一波长下，各组分吸光度具有加和性 应用：多组分测定 吸光系数 1．吸光系数的物理意义： 单位浓度、单位厚度的吸光度 讨论： 1）E=f（组分性质，温度，溶剂，λ） 当组分性质、温度和溶剂一定，E=f（λ） 2）不同物质在同一波长下E可能不同（选择性吸收） 同一物质在不同波长下E一定不同 3）E↑，物质对光吸收能力↑, 定量测定灵敏度↑ → 定性、定量依据 续前 2．吸光系数两种表示法： 1）摩尔吸光系数ε： 在一定λ下，C=1mol/L，L=1cm时的吸光度 2）百分含量吸光系数 / 比吸光系数： 在一定λ下，C=1g/100ml，L=1cm时的吸光度 3）两者关系 续前 3．吸光度测量的条件选择： 1）测量波长的选择： 最大吸收波长 2）吸光度读数范围的选择：选A=0.2~0.7 3）参比溶液(空白溶液)的选择： 一、定性分析 定性鉴别的依据→吸收光谱的特征 吸收光谱的形状 吸收峰的数目 吸收峰的位置（波长） 吸收峰的强度 相应的吸光系数 续前 1.对比吸收光谱的一致性 同一测定条件下， 与标准对照物谱图或标准谱图 进行对照比较 续前 2.对比吸收光谱的特征值 续前 3.对比吸光度或吸光系数的比值： 例： 续前 二、纯度检查 练习 解： 练习 解： 等吸收双波长法 例：消去b干扰，测a物质 ①绘制a、b绘物质的吸收光谱 ②选波长λ1、λ2(b等吸收，a的△A大) ③测定：λ1 A1a+b=A1a+A1b λ2 A2a+b=A2a+A2b ④计算 Ca=？ A=A2-A1 =(A2a+A2b )-(A1a+A1b ) =(A2a-A1a)+(A2b-A1b) =(E2a-E1a)CaL =KCa 计算公式： 测A消B △Aa=(Eλ2a – Eλ1a )Ca 测B消A △Ab=(Eλ2b – Eλ1b )Cb 选择波长原则：干扰组分在两波长的吸光度相等， 待测组分在两波长的吸光度差值 △A应足够大。 1．取咖啡酸，在165℃干燥至恒重，精密称取10.00mg，加少量 乙醇溶解，转移至200mL容量瓶中，加水至刻度线，取此溶 液5.00mL，置于50mL容量瓶中，加6mol/L的HCL 4mL，加 水至刻度线。取此溶液于1cm比色池中，在323nm处测定吸 光度为0.463，已知该波长处的 ，求咖啡酸百分 含量 * *  第二章 光谱分析法概论 光学分析法 电磁辐射与电磁波谱 光学分析法的分类 光学分析法 定义：利用光（电磁辐射）与物质相互作 用进行分析的方法 三个主要过程 能源提供能量 能量与被测物质相互作用 产生被检测信号 微粒性：能量 E=h ? =hc/λ= hcσ 电磁辐射与电磁波谱 电磁辐射：高速传播的光（量）子流（γ射线、X射 线、紫外可见、红外、微波、无线电波）。 波动性： 波长（λ）：光波移动-周的距离，“nm” 表征参数 频率（ν）：每秒钟的波动次数，“HZ” 波数（σ）：每厘米长度中波的数目，“cm-1” ?=C/λ，σ=1/λ=? /C 1m=100cm=106μm=109nm=1010AO 电磁波谱：将电磁波按波长顺序排列的图表 0.0003nm 0.03nm 300nm 30?m 30cm 30m γ射线 X射线 紫外可见 红外 微波 无线电波 辐射区段 波长 频率 波数 能量 跃迁类型 核反应 内层电子 外层电子 分子振动 分子转动 磁场诱导核自旋能级跃迁 电磁