il-10对心衰竭患者外周血单个核细胞促炎性细胞因子分泌和核转录因子κb活化的影响.pdf

IL．10对心力衰竭患者外周血单个核细胞促炎性细胞因子分 泌和核转录因子wB活化的影响 摘要 目的：探讨心力衰竭(heartfailure，HF)患者外周血单个核细胞 blood mononuclear (peripheral CK)分泌的 factor-KB，NF．KB)活化与促炎性细胞因子(cytokines 相关性：白细胞介素10(interleukin 炎性细胞因子分泌署IINF．KB活化的影响及IL-10抑制细胞因子的可能 机制，为IL-10应用于治疗HF提供理论依据。方法：①取15例心力衰 ml，肝 竭患者和15例正常人(健康对照组)的清晨空腹外周静脉血8 ml外周静脉血用 素抗凝，4ml血液用于提取血清检测细胞因子。另4 淋巴细胞分离液分离PBMCs，用含10％d、牛血清的1640培养基调整 细胞数量为2x107／ml，取30ul细胞：晷：液涂在载玻片上，室温下风扇吹 干，纯丙酮固定30分钟，干燥后保存，用于检澳IJNF．KB活性。②取 15例HF患者和15例正常人清晨外周静脉血8ml，肝素抗凝，用淋巴细 胞分离液分离PBMCs，每组15例，分三组对PBMCs进行培养：第一 基培养作为空白对照组；第二组用含有10％小牛血清、lOOu／ml青霉 培养液离心，吸取上清液用于检测细胞因子(TNF-a、IL-1B、IL一6)， 细胞悬液涂于载波片上，室温风扇吹干，纯丙酮固定30分钟，保存待 测，用于检测NF．r,B活性，PBMCs的NF．rJ3活性用免疫组化染色检测， 血清及培养上清液细胞因子的含量由放射免疫法测定。对指标进行t 检验及相关分析。结果：@HF患者外周血TNF．a、IL-6含极显著高于 VS VS44．91± 对照组(2．34_+0．51ng／L1．70_+0．58n∥L，164．88+17．58pg／L VS 8％+4％，P 色阳性百分率极显著高于健康对照组(25％±13％VS 0．01)。通过相关分析发现：外周血单个核细胞NF．rB核染色阳性百分 体外培养上清液的细胞因子水平：LPS组比空白组TNF．a、IL-1B极显 VS 著升高(29．03_+21．50 ng／L 10．63_+5．21ng／L，2．30ngL-+a．65ng／L 浴0．95+0．36 pg／LVS VS29．03_+21．50 显著降低(15．20-+10．80 ng／L ngL，P0．05)；IL- VS 19、IL-6呈极显著降低(0．73_+0．48ng／L2．30+_1．65ng／L，670．8 VS P0．01)。心衰患者体外 3_+664．36pg／L2084．57_+1850．50pg，k 培养的单个核细胞NF．KB胞核染色阳性率：LPS组比空白组极显著 升高(38％±9％VS 降低(18％±7％VS38％±9％，P0．01)。通过相关分析发现：心 VS1．79_+1．36 VS329．32_+280．57 ng／L ng／L，760．13_+549086pg／L ng／LVS0．60_+0．18 Pg／L，P0．05)：IL-1B极显著升高(O．86±O．27