第一篇微生物的生理资料.ppt

第一节 微生物的酶 第二节 微生物的营养 第三节 微生物的产能代谢 概述：酶的研究历史 酶的发现和提出：1897年，Buchner兄弟用不含细胞的酵母汁成功实现了发酵。提出了发酵与活细胞无关，而与细胞液中的酶有关。 1913年，Michaelis和Menten提出了酶促动力学原理—米氏学说。 1926年，Sumner从刀豆种子中分离、纯化得到了脲酶结晶，首次证明酶是具有催化活性的蛋白质。 1928年，Cech对四膜虫的研究中发现RNA具有催化作用。 酶是活细胞产生的一类具有催化功能的蛋白质，亦称为生物催化剂 Biocatalysts 。 绝大多数的酶都是蛋白质 (Enzyme和Ribozyme)。 酶催化的生物化学反应，称为酶促反应Enzymatic reaction。 在酶的催化下发生化学变化的物质，称为底物substrate。 三、酶的分类 单成分酶、全酶（双成份酶）； 胞内酶，胞外酶，表面酶； 结构酶，诱导酶； 水解酶、氧化还原酶、转移酶、异构酶、裂解酶、合成酶。 氨基酸的种类 肽和肽键 蛋白质的一级结构 蛋白质的二级结构 ?－螺旋 β－折叠 平行式 β－转角 蛋白质的三级结构 肌红蛋白的三级结构 4. 蛋白质的四级结构 五、酶蛋白的活性中心 必需基团:酶分子中有些基团若经化学修饰（氧化、还原、酰化、烷化）使其改变，则酶的活性丧失，这些基团称为必需基团。 非必需基团：有的酶温和水解掉几个AA残基，仍能表现活性，这些基团即非必需基团。 酶活性中心的结构特点 活性中心只占酶分子总体积的很小一部分，往往只占整个酶分子体积的1%-2%。 某些酶活性部位的AA残基 酶 AA残基数 活性部位的AA残基 核糖核酸酶 124 His12, His119, Lys41 溶菌酶 129 Asp52, Glu35 胰凝乳蛋白酶 241 His57, Asp102, Ser195 胃蛋白酶 348 Asp32, Asp215 木瓜蛋白酶 212 Cys25, His159 羧肽酶A 307 Arg127, Glu270,Tyr248,Zn2+ 六、蛋白质生物结构与功能的关系 蛋白质两性电离 七、酶的作用特点 （一）酶和一般催化剂的共性 用量少而催化效率高； 它能够改变化学反应的速度，但是不能改变化学反应平衡。酶本身在反应前后也不发生变化。 酶能够稳定底物形成的过渡状态，降低反应的活化能，从而加速反应的进行。 （二）酶作为生物催化剂的特性 酶的催化作用可使反应速度提高10７ –101３倍。 例如：过氧化氢分解 2H2O2 ? 2H2O + O2 用Fe3+ 催化，效率为6X10-4 mol/mol.S，而用过氧化氢酶催化，效率为6X106 mol/mol.S。 转换数（turnover number）的概念：每秒钟每个酶分子能催化底物发生变化的微摩尔数，用kcat表示（ ?mol/S ）。 ?-淀粉酶催化淀粉水解，1克结晶酶在65?C条件下可催化2吨淀粉水解。 2．专一性 Specificity 酶的专一性 Specificity 又称为特异性，是指酶在催化生化反应时对底物的选择性，即一种酶只能作用于某一类或某一种特定的物质。亦即酶只能催化某一类或某一种化学反应。 例如：蛋白酶催化蛋白质的水解；淀粉酶催化淀粉的水解；核酸酶催化核酸的水解。 （1）相对专一性 (Relative Specificity) 　有些酶的作用对象不是一种底物，而是一类化合物或一类化学键。这种专一性称为相对专一性(Relative Specificity)。包括： 族(group)专一性（对键两端的基团要求的程度不同，只对其中一个基团要求严格）。如?-葡萄糖苷酶，催化由?-葡萄糖所构成的糖苷水解，但对于糖苷的另一端没有严格要求。胰蛋白酶，水解硷性氨基酸的羧基形成的肽键。 键(Bond)专一性。如酯酶催化酯的水解，对于酯两端的基团没有严格的要求。 （2）绝对专一性（Absolute specificity) 有些酶对底物的要求非常严格，只作用于一个特定的底物。 这种专一性称为绝对专一性（Absolute specificity)。 例如：脲酶、麦芽糖酶、淀粉酶、碳酸酐酶及延胡索酸水 化酶（只作用于反丁烯二酸）等。 酶的一个重要特性是能专一性地与手性底物结合并催化这类底物发生反应。即当底物具有旋光异构体时，酶只能作用于其中的一种。