第八章吸附与离子交换资料.ppt

* * 一．离子交换剂 二．离子交换理论 三．影响离子交换的因素 一．离子交换剂 根据具有交换能力的pH范围不同，离子交换剂又分为强酸性阳离子交换剂和弱酸性阳离子交换剂、强碱性阴离子交换剂和弱碱性阴离子交换剂。 对阳离子具有交换能力，活性基团为酸性基团 对阴离子具有交换能力，活性基团为碱性基团 强离子交换剂的离子化率基本不受pH值影响，离子交换作用的pH范围宽； 弱离子交换剂的离子化率受pH影响很大，离子交换作用的pH范围小。 弱碱性离子交换剂在pH升高时，离子化率逐渐降低，离子交换能力逐渐丧失。 （离子化率与离子交换能力成正比） 离子化率与pH的关系 弱酸性离子交换剂在pH值降低时，其离子化率逐渐降低，离子交换能力逐渐减弱； 离子交换树脂是能在水溶液中交换离子的固体，其分子可以分成两部分： 一部分是不能移动的多价高分子基团，构成树脂的骨架，不溶于酸、碱和有机溶媒，化学稳定性良好； 另一部分是可移动的离子，称为活性离子（又称反离子），它们在树脂骨架中进进出出，发生离子交换现象。 高分子的惰性骨架和活性离子带有相反电荷并共处于离子交换树脂中。 以蛋白质类生物大分子为分离对象时，离子交换剂必须具有很高的亲水性和较大孔径。 常用于蛋白质分离纯化的离子交换剂基质主要有葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、纤维素和亲水性聚乙烯等； 常用于蛋白质离子交换的交换基团有DEAE、QAE(阴离子交换基)以及CM、SP和P(阳离子交换基)，其中以DEAE最为常用。 二．离子交换理论 在没有待分离的溶质存在时，离子交换剂表面的离子基团或可离子化的基团R一直被其反离子覆盖。 溶质与反离子带有相同的电荷，溶质的吸附是基于其与离子交换基团相反电荷的静电引力。 典型的离子交换过程发生下列反应： 阴离子反应 （8-20a） 阳离子反应 （8-20b） 其中，R+和R-分别表示阴离子交换基和阳离子交换基，U表示反离子，X表示溶质。 以阴离子交换剂为例，其离子交换的平衡常数为： （8-21） 在离子交换过程中，反离子U的浓度对溶质在固液两相间的分配系数m具有重要影响。 对于单价强电解质XH，发生完全解离，分配系数为： （8-22） 由式（8-21）和式（8-22）可得分配系数与反离子浓度的关系 （8-23） 即分配系数与反离子浓度成反比，表明离子交换的分配系数随离子强度的增大而下降。 对于单价弱电解质XH，仅发生部分解离 解离平衡常数为 （8-24） 分配系数则为 （8-25） 所以 （8-26） 若反离子和溶质的离子价分别为a和b(a、b可为正或负)的一般情况，离子交换反应为 （8-27） 则可得分配系数 （8-28） 其中m1是反离子浓度为1时溶质X的分配系数。 蛋白质是多价的两性高分子电解质，具有等电点。当溶液的pH偏离等电点，pHpI时带负电荷，可被阴离子交换剂吸附；pHpI时，带正电荷，可被阳离子交换剂吸附。 蛋白质在离子交换剂上的吸附同样受反离子浓度的影响。 用离子强度I代替式(8-28)中的反离子浓度，则蛋白质的分配系数与离子强度的关系为 （8-29） 理论上，Z为吸附一个蛋白质分子所交换的反离子数，即蛋白质的静电荷（b）与反离子的离子价数（a）之比的绝对值。 由于蛋白质是多价电解质，Z的数值一般在两位数以上，因此离子强度的微小变化会引起分配系数的很大改变。 另外，在相同的离子强度和pH下，蛋白质之间分配系数的差别往往很大。 由于离子交换过程中溶质的分配系数随离子强度增大而急剧降低，故离子交换操作需在低离子强度下进行。 三．影响离子交换的因素 1．离子交换剂及在其上面的离子的强弱 强的离子交换剂与强的反离子形成稳