多胺对pc12胞生长和信号转导的影响.pdfVIP

多胺对PCI2细胞生长和信号转导的影响 多胺对P012细胞生长和信号转导的影响 中文摘要 【目的】：研究多胺(精脒)及多胺合成抑制剂DFMO一定浓度对 号转导通路活化表达的特点及其相互之间的关系。 【方法】：取对数生长期嗜铬细胞瘤细胞株PCI2细胞，按照作用剂 1．25，2．5，5，10mmol／L) 的不同分为两组，即SPD组(分别含SPD 天观察PCI2细胞生长情况。光镜显微镜下观察细胞形态学变化；台盼 蓝染色法绘制细胞生长曲线；用四氮唑盐(MTT)H：色试验检测细胞的生 长或抑制；流式细胞仪检测细胞周期分布。同时用western．blot法检测 径的影响。 5，10mmol／L 【结果】：光镜显微镜下观察到： SPD作用PCI2细 胞4天后，细胞数较对照组明显增多，胞体更加粗大，细胞突起更加细 mmol／L 长，分支相连， 1．25，2．5 SPD作用PCI2细胞4天后，与对照 mmol／LDFMO 细胞皱缩变圆，细胞突起消失，出现大量漂浮细胞，2，8 作用PCI2细胞4天后与对照组相比大部分细胞变圆，细胞突起变短。台 盼蓝染色法绘制细胞生长曲线可见SPD组活细胞数明显增多，DFMO组 细胞数减少，而DFMO组加入SPD后与对照组相比没有明显变化。MTT 多胺对PCI2细胞生长和信号转导的影响 中文摘要 mmol／L 实验检测结果显示1．25，2．5，5，10 SPD作用4d时对细胞生长 mmol／L mmol／L 有促进作用，其中5 SPD促进率可达49．1％，；2，4，6，8 mmol／L DFMO作用4d时对细胞生长有明显的抑制作用，6 DFMO作用 后抑制率可达40．3％。流式细胞仪检测结果表明：与SPD组和对照组细 胞相比，6 mmol／L western—blot结果显示5 酸化水平呈逐渐升高趋势，尤其在第三天明显升高；而6mmol／LDFMO 组则逐渐降低，第三天降低幅度尤为显著。5mmol／L SPD作用1，2，3 天可见p38磷酸化水平呈逐渐降低趋势，其中第三天明显降低；而6 mmol／LDFMO组则逐渐升高，以第三天升高最为明显。 【结论】：SPD在一定浓度范围内对PCI2细胞生长具有促进作用， DFMO在一定浓度范围内对PCI2细胞则具有抑制作用。精脒通过 通过ERKl／2磷酸化水平降低和p38磷酸化升高导致细胞生长抑制，并 且均呈剂量和时间依赖效应。由此可见，ODC／多胺系统在调节神经细 胞生长增殖或抑制中所发挥重要作用可能是通过MAPKs信号转导途径 实现的。 关键词： 多胺DFMOPCI2细胞胞外调节蛋白(ERKl／2) 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 蛋白38(p38) 作 者：巫瑛 指导教Vili：古桂雄教授 of Effect ontheGrowthand Polyamine