反义timp-对实验性肝纤维化影响的研究.pdf

反义TI胛一l对实验性肝纤维化影响的研究 姓 名：李 睿 (内科学) 指导教师：郑 勇 教 授 摘 要 背景与目的：肝纤维化的主要特征是肝脏内细胞外基质(ECM)的生成和降解的失衡，调节ECM 合成、降解的～个重要环节是基质金属蛋白酶一基质金属蛋白酶抑制因子(MMPs，TIMPs)系统，其 纤维化的发生发展。国内外学者一致认为：肝纤维化过程中TIMP．1表达增高、抑制了MMPs的活 性，可促进肝纤维化的发展，因此抑制TIMP—i的表达也是阻止肝纤维化发生、发展的重要环节。本 研究旨在构建反义TIMP-l真核细胞表达质粒，以脂质体包埋后将其导入大鼠肝纤维化模型并获得 有效表达，以观察外源治疗性质粒的疗效，探讨基因治疗肝纤维化的可行性及有效性，为今后I临床 肝纤维化的基因治疗提供理论依据。 材科与方法： 1、反义质粒的构建：以Trizol Reagent抽提肝组织中总RNA，采用套式引物，以逆转录巢式PeR 的方法扩增TIMP．1目的片段并经测序鉴定，双酶切纯化TIMP．1 TIMP-I／P