外周血干细胞促管新生功能及其移植治疗肢体缺血的机制探讨.pdf

中国协和医科大学博j+研究生论文 糖尿病患者外周干细胞促血管新生功能的研究 摘要： 背景：临床上已证明了动员后外周血单个核细胞(M．PBMNCs)移植治疗严重 的下肢缺血有效。 进一步研究发现M．PBMNcs含有大量的内皮祖细胞，而糖 尿病人的内皮祖细胞在增殖能力和粘附趋化等功能上均存在缺陷。 目的：研究糖尿病患者来源的M。PBMNCs移植治疗肢体缺血的效果，探讨糖尿 病M．PBMNCs促进血管新生能力上是否有缺陷及其病理生理机制。 方法：链尿菌素诱导的糖尿病裸鼠下肢股动脉结扎造成重度缺血模型后，将来自 后1，2，4周时激光多普勒检测局部血流，观察活动度和缺血情况，利用动脉造 影显示侧支动脉的形成，免疫组化(CD3l、Ⅱ，SMactin阳性细胞)检测毛细血管 密度和小动脉密度，免疫荧光和荧光活体成像技术来示踪标有CM—Dil的移植细 胞，以及分泌的促血管新生因子vEGF，PDGF等，并观察周细胞／平滑肌细胞 (EGM．2Mv)，通过细胞增殖(BrdU阳性细胞)、粘附、血管网参入、血管新生模 型等测定糖尿病人M．PBMNcs的促血管新生能力。 结果：与PBs相比，糖尿病人M．PBMNcs促进缺血下肢血流和功能恢复，但其 疗效不及『F常对照。糖尿病人M．PBMNCs移植的缺血组织侧支循环、毛细血管