第十四章蛋白质的生物合成(翻译)资料.pptVIP

Protein Biosynthesis (Translation) 　 　 第一节 蛋白质合成体系 Protein Biosynthesis System 参与蛋白质生物合成的物质包括： 20种氨基酸作为原料 酶及蛋白因子，如IF、eIF等 ATP、GTP、无机离子 　 1961年，Nirenberg 证明了mRNA的模板作用。 遗传密码表 1. 连续性（commaless） 遗传密码的简并性 3. 通用性（universal） 蛋白质生物合成的整套密码，从原核生物到人类都通用。 有少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。 密码的通用性进一步证明各种生物进化自同一祖先。 4. 摆动性（wobble） 二、多肽链合成的装置--核蛋白体 A位点(aminoacyl site)氨酰-tRNA结合位点； P位点(Peptidyl site) 肽酰-tRNA结合位点； E位点 (exit site)去氨酰-tRNA结合位点。 三、tRNA与氨基酸的活化 　 　　　 真核生物： Met-tRNAiMet 原核生物： fMet-tRNAifMet 第二节 蛋白质生物合成过程 The Process of Protein Biosynthesis 　 　蛋白质合成中 　mRNA模板的方向：5′→ 3′； 　蛋白质的合成方向：N端→ C端。 　蛋白质合成过程： 　 一、肽链合成起始 二、肽链合成延伸 三、肽链合成的终止 一、肽链合成起始 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物 (translational initiation complex)。 参与起始过程的蛋白质因子称起始因子（initiation factor，IF）。 （一）原核生物翻译起始复合物形成 核蛋白体大小亚基分离； mRNA在小亚基定位结合； 起始氨基酰-tRNA的结合； 核蛋白体大亚基结合。 （二）真核生物翻译起始复合物形成 真核生物翻译起始的特点 核蛋白体是80S； 起始因子种类多； 起始tRNA的Met不需甲酰化； mRNA的5’帽子和3’poly A尾结构与mRNA在核蛋白体就位有关； 起始tRNA先与核蛋白体小亚基结合，然后再结合mRNA 二、肽链的延长 指按照mRNA密码序列的指导，依次添加氨基酸从N端向C端延伸肽链，直到合成终止的过程。肽链的延长是在核蛋白体上连续性循环式进行，又称为核蛋白体循环（ribosomal cycle)，每次循环增加一个氨基酸，分为以下三步： 进位（entrance）；成肽（peptide bond formation）；转位（translocation). （二）成肽 （三）转位 延长因子EF-G有转位酶（translocase ）活性，可结合并水解1分子GTP，促进核蛋白体向mRNA的3’侧移动。 　 蛋白质合成后加工和输送Posttranslational Processing Protein Transportation 主要包括 从核蛋白体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性，必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为天然构象的功能蛋白。 蛋白质前体的加工 新生多肽链的加工修饰 1．N端fMet或Met的切除：细菌蛋白质N端的甲酰基能被脱甲酰化酶水解，原核生物和真核生物N端的甲硫氨酸在多肽链合成完毕之前被切除 2．二硫键的形成 二硫键是蛋白质合成后通过两个半胱氨酸的氧化作用生成的。 蛋白质前体的加工 新合成得到前胰岛素原，切去信号肽变成胰岛素原，再切去C-肽变成有活性的胰岛素。 不少多肽类激素和酶的前体也要经过加工才能变为活性分子。 蜂毒素能溶解动物细胞，也能溶解蜜蜂自身的细胞，在细胞内合成没有活性的前毒素，分泌进入刺吸器后，N端的22个氨基酸残基被蛋白酶水解生成毒素。 　　 （二）线粒体蛋白的靶向输送 （三）细胞核蛋白的靶向输送 Met 40S Met Met 40S 60S mRNA eIF-2B、eIF-3、 eIF-6 ① elF-3 ② GDP+Pi 各种elF释放 elF-5 ④ ATP ADP+Pi elF4E, elF4G, elF4A, elF4B,PAB ③ 真核生物翻译起始复合物形成过程 Met-tRNAiMet-elF-2 -GTP Met 60S 原核生物的起始tRNA是fMet-tRNAfMet，而真核生物是Met-tRNAMet。原核生物中30S小亚基首先与mRNA相结合，再与fMet-tRNAfMet结合，最后与50S大亚基结合。 在真核生物中，40S小亚基首先与Met-tRNAMet相结合，再与模板mRNA结合，最后与60S大亚基结