抑制端粒酶活性宫颈癌细胞增殖关系的研究.pdfVIP

中国医科大学研究生学位论文独创性声明 本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及 取得的研究成果．据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论 文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或 其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研 究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意． 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任． 论文作者签名 ：礞私、嘎 日期：也!：!：兰 中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书 本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在 攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学．本人保证毕业高 校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师 为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国 家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅．学 校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，以采用影印、缩 印或其他手段保存论文． 论文作者签名滞刚弘 论文作者签名：壁 ：． 指导教师签名：丘{箩 r币面匾) 抑制端粒酶活性与宫颈癌细胞增殖关系的研究 目 的 密切相关，抑制端粒酶活性可达到抑制肿瘤细胞增殖、阻止肿瘤细胞永生 化，促进肿瘤细胞死亡的目的。本研究旨在通过观察体外培养的宫颈癌细 胞株HeLa细胞在二氧化硒(selenium 生长增殖的变化及端粒酶活性的变化，探讨宫颈癌细胞的增殖与端粒酶活 性之间的关系。 方 法 用不同时间后HeLa细胞增殖的变化；通过倒置显微镜观察不同浓度SeO： 性的变化。 结 果 (1)HeLa细胞形态学变化 在SeO：作用下，HeLa细胞逐渐变圆悬浮，细胞间接触变松，折光性及 贴壁能力减弱，细胞增殖减慢，细胞中颗粒逐渐增多变粗，悬浮细胞形状逐 Se02处理 渐变不规则，随药物浓度增高可见细胞周围碎片增多。3laanol／L 在72h时后才出现可见形态差异；101,tmol／L 状态变化明显，在24h时即出现贴壁不均和变圆悬浮，随处理时间的延长这 种变化更明显；30p,mol／LSeO：处理的HeLa细胞生长状态变化最明显，在 24h时细胞就大量变圆悬浮，96h时细胞只有很少贴壁，大部分细胞呈大片 状漂浮，细胞形状极不规则，颗粒浓重粗黑，细胞周围出现大量碎片。 (2)HeLa细胞生长增殖的变化 h和48 在3 h时HeLa细胞的生长抑制不明 p．mol／LSe02作用下，24 LSeO：作用下，HeLa细胞的生长明显受抑制，24 、77．19％；30 h、 77％、96．95％。 (3)TRAP—PCR一银染法检测端粒酶活性的结果 12％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳显示HeLa阳性对照细胞有较强的端 粒酶活性表达，3 相比变化不明显，48h后有所下降，72h后降低更明显；101xmol／LSe02作用 24h后HeLa细胞端粒酶活性即开始下降，但此时端粒酶活性尚较强，48h SeO：作用后的HeLa细胞端粒酶活性下降最明 后下降更明显；30IJ．mol／L 显，在24h后即出现显著降低，48h后更低，96h后几乎测不到端粒酶活性。 结 论 HeLa细胞的增殖与其端粒酶活