微型载体无保护冷冻微量精子的初步研究.pdf

微型载体无保护剂冷冻微量精子的初步研究 硕士研究生：蒋凌英 导师：靳镭，朱桂金教授 华中科技大学同济医学院附属同济医院生殖医学中心 中文摘要 第一部分 精子冷冻环无保护剂玻璃化冷冻方法的实验研究 目的 通过探讨冷冻环无保护剂玻璃化冷冻微量精子的可行性，试图寻找一种适合 于睾丸或附睾微量精子的冷冻方法。 方法 正常标本上游处理后分别进行慢速冷冻和冷冻环无保护剂的玻璃化冷冻，复 苏后分别从活动率及电镜下超微结构等指标来比较两种冷冻方法的效果。 结果 ： 两种方法冷冻后其活动率之间差异无显著性(44．5％VS43．5％，PO．05)，但 0 43．5％VS 均较未冷冻时明显下降(44．5％VS 88．5％，PO．001)。超微结构亦较 未冷冻时发生了一定的改变，但核结构基本保持完整。 结论 ‘’ 精子冷冻环无保护剂的玻璃化冷冻是一种简单、方便而有效的冷冻方法；冷 冻环有望成为适合于睾丸或附睾微量精子冷冻的一种新型载体。 关键词 冷冻环；无保护剂玻璃化；微量精子：无精子症 - Z f、 ．‘ ■ 0 ● 第二部分 k 微滴法无保护剂玻璃化冷冻正常精子的可行性探讨 目的 探讨在不添加冷冻保护剂的情况下微滴法玻璃化冷冻正常精子的可行性 方法 收集16份正常精液标本，上游处理后分别进行慢速冷冻和微滴法冷冻，微 滴法即用拉细巴氏管将标本形成lOul的液滴，直接投入液氮内冻存，复苏后镜 检其活动率。 结果 vs 两种方法冷冻后其活动率之间差异无显著性(4096 37．5％，PO．05)，但均 较未冷冻时明显下降(40％vs37．5％vs85％。PO．001)。 结论 无保护剂的微滴法玻璃化冷冻正常人类精子可以取得较理想的结果；但需进 一步探索以提高其复苏率。 关键词 0 微滴；无保护剂；微争籍子；冷冻 ， 。) 向 量 { 2 第三部分 微滴法无保护剂玻璃化冷冻PESA精子的可行性探讨 目的 探讨微滴法无保护剂玻璃化冷冻PESA精子的可行性 方法 收集12份PESA精子标本，洗涤处理后进行无保护剂的微滴法冷冻，用拉细 巴氏管将标本形成10ul的液滴，直接投入液氮内冻存，复苏后镜