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sirt1在肺脉高压血管重塑中的作用和机制研究
目录
EjjiE…………………………………………………………………………………………………………………………………i
摘要………………………………………………………………………………………………………………………………．．1
Abs仃act…………………………………………………………………………………………………………………………。3
前言………………………………………………………………………………………………………………………………．5
l肺动脉高压预后差，治疗难…………………………………………………………………5
2肺动脉平滑肌细胞增殖与肺动脉高压………………………………………………………5
2．1血管平滑肌增殖是血管重塑的重要细胞学基础…………………………………………5
2．2肺血管重塑与肺动脉高压的发生、发展密切相关………………………………………6
3血管平滑肌细胞周期及其调控………………………………………………………………6
3．1血管平滑肌细胞的增殖周期………………………………………………………………6
3．2细胞周期调控………………………………………………………………………………7
4 K+通道蛋白与肺动脉平滑肌增殖以及PAH的关系………………………………………。8
5 SIRTl在肺动脉平滑肌增殖，肺动脉高压发生、发展中可能发挥的作用………………9
6SIRTl是否能抑制肺动脉平滑肌增殖并延缓肺动脉高压的发生、发展是本研究的重点lO
l
实验材料…………………………………………………………………………………………．1
1病毒………………………………………………………………………………………………………………………．．1l
：!细胞………………………………………………………………………………………………………………………．．1l
l
3实验用大鼠及饲料…………………………………………………………………………．1
4酶罗乓………………………………………………………………………………………………………………………．．11
．5其他主要试剂……………………：……………………：……………………………………．11
6实验用抗体…………………………………………………………………………………．．1l
7主要仪器设备…………………………………………………………………………………12
实验方法…………………………………………………………………………………………13
1人肺动脉平滑肌细胞(HP：ASMC)培养与腺病毒感染…………………………………．．13’
1．1人肺动脉平滑肌细胞传代培养…………………………………………………………．．13
3
1．2人肺动脉平滑肌细胞的冻存………………………………………………………………1
1．3人肺动脉平滑肌细胞的复苏………………………………………………………………．13
1．4人肺动脉平滑肌细胞的腺病毒感染……………………．．．…………．．．…………………13
1．5人肺动脉平滑肌细胞同步化处理………………………………………………………．．14
2重组腺病毒的制备…………………………………………………………………………．14
2．1建立备用病毒……………………………………………………………………………～14
2．2重组腺病毒的生产…………………………………………………………………………14
5
2．3病毒纯化…………………………………………………………………………………～1
5
2．4重组腺病毒质量检测．．：…………………………二…………………：…j…………………1
3 R，r-PCR……………………………………………………………………………………………………………………16
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