zvad-fm、l-name对体外组织培养法保存异体软骨组织活性的影响.pdf

ZVAD。fmk、L．NAME对体外组织培养法保存异体 软骨组织活性的影响 研究生：刘召庆 专业：运动医学 导师：元建洪教授 中文摘要 目的 骨组织一定时间，观察其是否具有提高软骨细胞成活率、保持软骨组织活性 的作用，进而探索具有提高软骨组织保存效果的培养液成分。 材料与方法 以羊膝关节骨软骨为研究标本，无菌条件下，用自制取软骨器获取同样 液冲洗3遍，随机分配到A组、B组、c组三个不同培养液成分的无菌培养 瓶中进行保存，分别为A组(对照组)：基础保存液，B组：基础保存液中添 ℃、每隔两天换液的条件下，分别于保存第1、2l、35天每瓶取出30块进 V．FITC与PI 行检测，包括EB／FDA双荧光法测软骨细胞存活率，Annexin 双染色法测定软骨细胞凋亡率(流式细胞仪定量检测)，软骨组织番红一O染 色。 结果 第1天时，三组细胞成活率均保持在90％以上，各组之间差异无统计学意 义(PO．05)。三组细胞凋亡率凋亡率均在5％左右，差异不具有统计学意义 统计学意义(P0．05)。第2l天时，三组软骨细胞成活率均出现下降，其中A 各组细胞凋亡率均有上升，以其中C组最为明显，三组之间比较差异有统计 1 各组之间差异比较具有统计学意义(P0．05)。第35天时，各组成活率均出 三组间差异比较有统计学意义(PO．05)。各组凋亡率均出有上升，其中A组(基 以上，而其他两组则下降明显，三组间差异比较有统计学意义(PO．05)。 结论 存的异体软骨组织活性以及软骨细胞存活率；在基础保存液中添加15mg／L的 L．NAME，没有提高体外保存的异体软骨组织活性以及软骨细胞存活率。 意义 关节软骨全层缺损的修复方法与效果不佳一直是困扰临床运动医学医 生与骨科医生的一大难题。虽然，国外临床上异体骨软新鲜骨移植治疗全层 软骨损伤取得了肯定的效果，其优点为取材相对容易、无需二次手术等，但 由于没有理想的体外液体保存软骨移植物的方法，影响了临床应用与推广。 因此，延长同种异体软骨移植物的体外保存时间并保持其活性成为学者研究 的焦点。本课题研究发现组织体外培养液中加入ZVAD—fmk具有保持软骨细 胞成活率以及组织活性的作用，为下一步研究理想的组织培养保存液奠定了 基础。 关键词：关节软骨；异体移植；液体保存；组织培养；骨软骨移植物 2 OF EFFECToFZVAD．fmk、L．NAMEONVIABILITY PRESERVED CARTILAGEALLoGRAFT ARTLCULAR INVITRO INTISSUECULTURE Liu Postgraduatestudent：Zhaoqing Medicine Major：Sports JianhongQi Supervisor：Professor ABSTRACT Objective ZVAD—fmk、L—NAMEtotissueculture