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协同刺激分子B7-H1 和B7-H3 在食管癌中表达的临床意义及作用研究 中文摘要 协同刺激分子B7-H1 和B7-H3 在食管癌中表达的 临床意义及作用研究 中文摘要 近年来，对肿瘤微环境和肿瘤免疫逃逸机制的深入研究发现，一组介导免疫调 节的重要分子—免疫卡控点(Immune checkpoints) ，如 B7 家族负性协同刺激分子： B7-H1 、B7-H3 、B7-H4 、CTLA-4 和Tim-3 等，可异常表达于诸多人类肿瘤组织及肿 瘤浸润的免疫细胞，参与肿瘤免疫逃逸并与患者的临床病理参数及预后密切相关，是 肿瘤微环境的重要组成部分。它们一方面通过负性调控T 细胞介导的抗肿瘤应答，另 一方面通过调节肿瘤细胞自身的生物学行为，共同参与肿瘤的发生与发展。截至目前， 协同刺激分子B7-H1 、B7-H3 分子在食管癌中的异常表达的临床意义及生物学作用尚 待深入研究。本课题一方面通过收集临床样本进行回顾性研究，采用免疫组织化学及 流式细胞术分别检测协同刺激分子B7-H1 和B7-H3 在人食管癌细胞系及食管癌组织 中的的表达水平，同时分析它们与患者的临床参数、预后、上皮间质转化 (epithelial-to-mesenchymal transition, EMT)及T 淋巴细胞浸润程度等的相关性；另一方 面在细胞及分子生物学水平，进一步研究食管癌细胞株中异常表达 B7-H3 分子对其 自身细胞生物学行为的影响。 本研究结果显示：(1)协同刺激分子 B7-H1 在食管癌细胞株及食管癌组织中呈高 表达，而在癌旁正常组织中呈低表达；食管癌组织中协同刺激分子 B7-H1 主要表达 在食管癌细胞的胞浆及胞膜。(2)协同刺激分子 B7-H1 在食管癌组织中的表达水平与 肿瘤浸润深度成显著正相关(P=0.0261) ；食管癌组织中B7-H1 高表达的患者，其预后 显著差于B7-H1 低表达的患者(HR=2.157, 95% CI: 1.017-4.577, P=0.0452) 。(3) 协同 刺激分子 B7-H1 亦可部分表达于食管癌细胞的细胞核，其在食管癌细胞核内的表达 水平与肿瘤浸润深度成显著正相关(P=0.0331)，B7-H1 在食管癌细胞核内的表达水平 与患者预后无显著相关性(P=0.6755) 。(4)我们通过E-cadherin 及Vimentin 表达水平的 组合，来鉴定食管癌组织中 EMT 的发生情况，结果发现，食管癌组织中存在 EMT I 中文摘要 协同刺激分子B7-H1 和B7-H3 在食管癌中表达的临床意义及作用研究 的现象，并且T(3+4)组的患者，其EMT 发生的比率显著高于T(1+2)组的患者(P=0.0097) ； 远处转移组(M )组的患者，其EMT 发生的比率显著高于未发生远处转移组(M ) 的患 1 0 者(P=0.0253) ；生存分析结果显示，EMT 组患者的预后显著差于未发生EMT 组的患 者(HR=2.470, 95% CI: 1.971-2.970, P=0.0278) ；我们将性别、年龄、肿瘤大小、TNM 分期、EMT 状态纳入COX 模型进行多因素分析，结果显示EMT 状态可以作为独立 的预后风险因素(HR=2.306, 95% CI: 1.103-4.824, P=0.026) 。(5)我们发现EMT 组中 B7-H1 高表达的比率显著高于未发生EMT 组患者(P=0.0314) ，B7-H1 高表达及EMT 组的患者，其预后显著差于B7-H1 低表达及未发生EMT 的患者(HR=2.876, 95% CI: 1.182-6.997, P=0.0199) 。(6)协同刺激分子B7-H3 在食管癌细胞株及食管癌组织中呈高 表达，而在癌旁正常组织中呈低表达，B7-H3 在食管癌细胞中的表达主要定位于胞浆 胞膜。(7)食管癌组织中B7-H3 的表达水平与肿瘤浸润深度呈显著正相关(P=0.0200) ， + 与 CD3 T 淋巴细