大鼠心脏骤停心复苏后脑皮质及海马神经细胞自噬水平的动态变化.pdfVIP

中文摘要 大鼠心脏骤停心肺复苏后脑皮质及海马神经细胞自噬水平的动态变化 II III 中文摘要 大鼠心脏骤停心肺复苏后脑皮质及海马神经细胞自噬水平的动态变化 大鼠心脏骤停心肺复苏后脑皮质及海马神经细胞自噬水 平的动态变化 中文摘要 目的： 1、按照Utstein 模式建立窒息法心脏骤停模型和致颤法心脏骤停模型，比较两组 模型的差异并观察大鼠自主循环恢复后24h 组织病理学变化特点。 2 、观察大鼠心脏骤停心肺复苏后脑皮质及海马神经细胞自噬水平的动态变化情 况，探讨心肺复苏后自噬的发生及其变化规律。 方法： 1、分别采用窒息法和致颤法制备大鼠心脏骤停模型，比较两组大鼠在诱发心脏 骤停时间、神经功能缺损评分、心脏骤停心电图变化、复苏成功率及自主循环恢复后 24h 存活率的差异；并观察大鼠自主循环恢复后24h 脑皮质及海马组织病理学变化特 点。 2 、采用经皮电刺激心外膜法建立大鼠心脏骤停模型（致颤法），利用随机数字法 将大鼠分为7 组：空白对照组仅进行麻醉、气管插管、动静脉置管等操作，不诱发心 脏骤停（0h 组）。采用致颤法制备大鼠心脏骤停复苏模型，在恢复自主循环后3h ，6h， 12h，24h ，48h ，72h 各时间点分别充分麻醉后处死大鼠，取材，透射电镜下观察脑 组织自噬超微结构变化，采用Western-blot 、免疫组化检测脑皮质及海马神经细胞自 噬相关蛋白Beclin-1、LC3II 的变化。 结果： 1、窒息组从窒息开始到出现心脏骤停的间隔时间为292.7 ±51.5sec，而致颤组从 释放交流电至出现心脏骤停的间隔时间为2.5 ±1.2sec，致颤组诱导心脏骤停时间较窒 息组时间明显缩短（P0.05 ）；窒息组心电图表现为心电静止5 例，无脉搏电活动10 例，共15 例，而致颤组心电图表现为室颤6 例，心电静止7 例，无脉搏电活动2 例， 共 15 例；窒息组复苏成功6 例，自主循环恢复后24h 存活4 例，致颤组复苏成功9 例，自主循环恢复后24h 存活6 例；采用神经功能缺损评分，在 12h、24h 两个时间 IV 点时窒息组评分明显低于致颤组（P0.05 ）；HE 染色发现，窒息组较致颤组的神经组 织损害病理变化更加明显。 2 、透射电镜下观察致颤法心脏骤停复苏模型发现，自噬体在6h 组开始出现，24h 组达高峰，48h 组逐渐减少。免疫印迹和免疫组化分别检测脑皮质及海马神经细胞自 噬相关蛋白Beclin-1、LC3II 含量，与空白对照组（0h ）相比，恢复自主循环后上述 两种蛋白表达逐渐升高，24h 时达峰值，48h 及72h 时又有所下降。 结论： 1、心脏骤停模型的建立中，致颤法较窒息法诱导心脏骤停所需时间明显缩短， 其心脏骤停的心电图类型也更类似于临床，并且心肺复苏成功率及24h 存活率也高于 窒息法。故此，致颤法是心肺复苏较理想的实验模型。 2 、大鼠心脏骤停心肺复苏后自噬被激活，并持续一定的时间，提示自噬在大鼠 心脏骤停后脑损害中可能具有一定的作用。 关键词：心脏骤停；心肺复苏；脑皮质；海马；自噬；Beclin-1；LC3II 作者：钱会银 指导老师：刘励军教授 V 英文摘要 大鼠心脏骤停心肺复苏后脑皮质及海马神经细胞自噬水平的动态变化 The dynamic change of autophagy in the tissue of cerebral cortex and hippocampus following cardiac arrest in rats