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中药软肝宁对肝纤维化大鼠TGFp,、
Smad2/3表达的影响
目 的
我国是乙型肝炎发病率较高的国家,肝炎不经有效治疗进展为肝纤维
化是它的发展趋势之一,而肝纤维化经适当治疗后可逆转,本文通过测定
肝组织中的表达,探讨中药方剂软肝宁的疗效。
材料和方法
型组、治疗组和预防组4组,除正常组外其余三组均用40%CCL。造模8周
(0.2彬1009)。预防组造模1周后中药灌胃,治疗组造模4周后中药灌胃
别经HE染色后作病理分级,测定肝重及脾重并计算肝指数、脾指数以确定
不同组别大鼠应用中药后的变化,应用碱水解法测定肝组织羟脯胺酸
亲生物素一过氧化物酶(S—P)免疫组化染色和免疫印迹法(Wes【em—
Blot)测定肝组织中TG耶,和smad2/3蛋白的表达,免疫组化抗体浓度为l:
200,免疫印迹一抗浓度为l:400,二抗浓度为l:500,免疫组化染色和免疫
印迹结果经计算机显微镜图像分析系统分析量化,所有实验数据用叉±s表
示,进行t检验。
结 果
一般状态:8周末正常组同实验前,CCL4模型组实验结束时毛色变黄,
·1·
活动摄食均减少,中药预防组和中药治疗组的状态较cCL4模型组好。
体重:正常组大鼠体重增长明显、其次为预防组、治疗组。模型组增长
缓慢,与正常组相比较,有显著性差异(PO.01)。预防组和治疗组大鼠体
重有所增加,与模型组相比较,有统计学差异(Po.05)。
肝脾指数:治疗组和模型组与正常组肝指数比较有显著差异(PO.
01)。预防组、治疗组和模型组与正常组脾指数比较有显著差异(P0.
01)。预防组肝指数、脾指数与模型组比较有显著差异(PO.01)。治疗
组肝指数与模型组肝指数比较有统计学差异(PO.05)。
HE染色结果:各组肝组织经病理分级后采用Ridit分析方法,模型组与
正常组相比P0.0l。预防组、治疗组与模型组相比PO.05。
肝组织Hyp和HA:预防组、治疗组和模型组Hyp和HA数值与正常组
比较有显著差异(P0.01);预防组、治疗组Hyp和HA数值与模型组比较
有显著差异(PO.01);预防组与治疗组Hyp和HA数值比较没有统计学
意义(P0.05)。
s—P染色阳性物质均
肝组织免疫组化及免疫印迹:TG邛,和Smad2/3
呈棕黄色,显微镜下观察:阳性物质从正常组、预防组、治疗组和模型组有逐
渐增多趋势。S—P经显微镜图像分析系统分析量化:预防组、治疗组和模
常组、预防组、治疗组到模型组逐渐加深,条带逐渐增宽,蛋白质经转印到
NC膜后经GIS一2020凝
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