应用肿瘤基因解工程数据库及rna干扰技术检测大肠癌基因表达谱.pdfVIP

应用肿瘤基因解工程数据库及rna干扰技术检测大肠癌基因表达谱.pdf

  1. 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
  2. 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  3. 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  4. 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  5. 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  6. 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  7. 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
应用肿瘤基因解工程数据库及rna干扰技术检测大肠癌基因表达谱

应用肿瘤基因解剖工程数据库及RNA干扰技术 检测大肠癌基因表达谱 中文摘要 第一部分应用肿瘤基因解剖工程数据库检测大肠癌基因表达谱 【目的】进一步了解大肠癌与正常组织间基因表达谱差异,寻找可能用于临床 诊断和治疗的目的基因。 【方法】应用美国肿瘤基因解剖工程(CGAP)数据库中基因表达序列分析 (SAGE)数据筛查大肠癌和正常组织差异表达基因,并用RT-PCR方法进一步 and 在大肠癌细胞株(SWIll6,Lovo,HCT8Hoe8693)及20例大肠癌及相应癌 旁组织标本中进行验证。 【结果】 常组织(NC一1,NC.2)SAGE数据进行对比分析,筛选大肠癌、正常组织差异 其中肿瘤组织基因表达高于『F常组织10倍以上差异基因33个,20倍以上差异 基因16个。相反,肿瘤组织基因表达低于正常组织10倍以上54个,20倍以 上差异者25个。 因表达不同,基因检测阳性率分别从35.3%到76.5%不等,可能与不同来源的大 肠癌细胞株生物学特性差异有关。在大肠组织标本中基因检0H,Uget性率达88.2%, 说明大肠组织SAGE检测与RT-PCR验证结果基本相符。 为7/20(35%),p0.01。 【结论】本研究结果提示利用CGAP数据库中SAGE数据能快捷、可靠地筛查 大肠癌差异基因表达谱,进一步分析这些基因的过度差异表达情况,可能为临床 提供诊断和治疗的相关基因指标。 第二部分RNA干扰介导TGFIBI沉默抑制大肠癌细胞生长 【目的】对于基因表达谱技术检测出来的大量差异基因,进一步鉴定其功能是 目前基因表达谱研究领域很少涉及的,在此我们用RNA干扰(RNAi)技术初步 研究本课题第一部分研究筛查的差异表达基因TGFl31对大肠癌细胞周期和细胞 生长的影响。 【方法】自行设计并用体外合成方法合成针对TGF Jgl小片段干扰RNA(siRNA), 用脂质体转染大肠癌细胞株HCTl16,用流式细胞仪和软琼脂克隆实验观察siRNA 转染后大肠癌细胞的细胞周期、生长及成瘤性的变化。 【结果】(一)我们设计并用体外合成方法合成了TGF[H的2个小片段干扰RNA 59%一82.5%,进入G2期细胞减少。软琼脂克隆形成实验结果显示转染组细胞克隆 形成率较对照组显著下降,说明抑制TGF[31能降低肿瘤细胞生长及其成瘤性。 Bl表达抑制的显著差异性,但对HCTI16细胞的细胞周期影响及软琼脂克隆实 验方面还是有所差异,TGF[31—1片段似乎优于TGFIgl一2片段。但二者均可有效 抑制大肠癌细胞的侵袭性,并取消TGFl31的G1期阻滞效应。 【结论】本研究结果提示通过转染针对TGF[31的siRNA能有效抑制其在细胞中 的表达,影响细胞周期变化并降低大肠癌细胞生长及成瘤性,RNAi能够快速地 了解目的基因功能,可作为进一步研究基因表达谱差异基因的有效方法。 【总结】 综上所述,我们首先在国内应用CGAP数据库对大肠癌差异基因表 达谱进行了快速有效的检测及确证,RNAi技术可以有效分析差异基因TGFIBl 功能,抑制TGFl31使大肠癌细胞s期阻滞并减低肿瘤细胞生长及成瘤性。进一 发病机制的研究有一定价值。 关键词:大肠癌:基因表达谱;基因表达序列分析;TGFl31;RNA干扰 oftheProffiesofGene in Cancer Analysis Colon Expression by CancerGenome andRNAInterference Using Anatomy Project Abstract I Part Detectionofthe of incoloncanc

您可能关注的文档

文档评论(0)

jiuqie957379 + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档