腺病毒载体adbdnf-egfp的构建和在神经干细胞中的表达.pdfVIP

摘要 cord 随着现代交通以及建筑的发展，脊髓损伤(spinalinjuryS00患者的数量 与日俱增。外伤性的脊髓损伤危害严重，常导致截瘫。包括外科手术、药物治疗 等在内，很多方法正在用于治疗脊髓损伤，恢复患肢功能。神经干细胞OqSCs) 移植是一种新的治疗方法，植入的细胞可以替代受损区域的细胞，促进神经元回 路的重建，恢复脊髓功能。本研究是通过分子生物学技术，在体外构建整合有 BDNF基因的腺病毒载体，感染体外培养的脊髓神经干细胞，诱导细胞向神经元 分化。为以后干细胞体内移植治疗脊髓损伤提供实验依据。 第一部分脊髓源性性神经干细胞的培养与分化 目的探讨大鼠脊髓源性胚胎神经干细胞体外分离培养增殖及分化，为进一 步的实验研究提供基础。 · 方法取孕14～16d的SD大鼠胚胎脊髓在条件培养基中培养增殖传代分化， 用神经干细胞特异性抗体一巢蛋白(Nestin)鉴定克隆细胞，用特异性的单克隆抗 体鉴定克隆球诱导分化后的细胞。用Brdu免疫荧光对神经干细胞传代能力检 测。 结果获得了大量能自我增殖并分化的细胞，分化后主要产生神经元特异性