2天然药物化学成分的提取分离和鉴定的方法和技术讲解.pptVIP

洗脱规律： 分子量大的成分先洗下 分子量小的成分后洗下 适用范围： 适用于分离分子量大小差别明显 的化合物 （一）酸碱沉淀法 （二）试剂沉淀法 三、沉淀法： 某些酸、碱或具内酯结构的化合物可采用加入碱、酸调节溶液的pH值，利用分子状态的（游离型或解离型）变化，使其溶解度改变而实现分离的方法。 （一）酸碱沉淀法 利用一些成分能与某些试剂产生沉淀或某些成分在不同溶剂中溶解度差异的性质，通过在溶液中加入特定的试剂或溶剂，使这些成分生成沉淀而与其他成分分离的方法。 （二）试剂沉淀法： 如： ① 生物碱的酸性液 + 加入生物碱沉淀试 剂生物碱难溶性复盐↓ ②鞣质 + 明胶、蛋白质溶液 复合物↓ 1.结晶法： 利用混合物中各成分在溶剂中因温度不同引起溶解度的改变，使部分成分析出结晶。 2.重结晶法： 选择适当的溶剂让结晶再一次溶解和析出结晶的过程。 四、结晶与重结晶法 小分子物质（无机盐、氨基酸等）在溶 液中可通过半透膜，而大分子物质如多 糖、蛋白不能通过半透膜的性质达到分 离的方法。 五、透析法 水提液中，加入无机盐至饱和，有效成分沉淀析出，其它水溶性杂质溶于水。 如： 三七的水提液中加硫酸镁→三七皂甙乙↓ 三颗针中提取小檗碱→氯化钠或硫酸铵盐析。 六、 盐析法 七、色谱法 定义： 是一种依据物质的物理化学性质（如极 性、溶解性、离子交换能力、分子大小 等）的不同而进行分离分析的方法。 2. 基本原理： 是利用混合物中各成分在固定相和 移动相中吸附力、分配及其亲和力的差异而达到分离。 3. 分类： （1）按移动相种类的不同分为：气相色谱和液相色谱 （2）按操作方式的不同分为：柱色谱、纸色谱 和薄层色谱 （3）按色谱原理不同分为：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶色谱 一 吸附色谱法 吸附的类型： 物理吸附（physical adsorption）： 也称表面吸附，常见如硅胶、氧化铝、活性炭吸附。是目前吸附色谱最主要的分离依据。 化学吸附（chemical adsorption）： 如黄酮等酚酸性物质与碱性氧化铝。 半化学吸附（semi-chemical-adsorption）： 聚酰胺对黄酮、醌类的氢键吸附。 物理吸附基本规律—相似者易于吸附 吸附三要素：吸附剂、溶质、溶剂。 吸附剂 溶剂 溶质 吸附法分离的依据： 化合物极性差异大，吸附性差异 大，分离效果愈好。 常用的吸附剂有： 硅胶、氧化铝、活性炭、聚酰胺、大孔吸附树脂等。 1. 活性炭： 是非极性吸附剂，对非极性物质具 有较强的亲和力。 吸附规律： ①芳香族化合物吸附力＞脂肪族化合物 ②分子量大的化合物吸附力＞分子量小 ③水中对溶质的吸附力＞有机溶剂中对 溶质的吸附力 2. 硅胶、氧化铝：为极性吸附剂。 吸附原理： 硅醇基与化合物形成氢键 硅醇基与水形成氢键 硅胶吸附的水分愈多，吸附其他化合物的 能力愈弱。 吸水量超过17％，不能作为吸附剂了。 在100～110℃加热30min时即可除去水， 恢复吸附活力，这一过程称为硅胶的活化。 ① 对强极性物质的亲和力强于弱极性物质。 ② 溶剂极性弱，吸附剂对溶质吸附力强， 溶剂极性增强，吸附剂对溶质吸附力弱。 ③溶质被硅胶、氧化铝吸附，当加入极性 较强的溶剂时，又可被后者置换洗脱下来。 吸附规律： 为了避免化学吸附， 分离酸性物质，如分离蒽醌类宜用硅胶； 分离碱性物质宜用氧化铝 缓解化学吸附： 薄层层析分离酸性（碱性）物质时， 展开剂中加入适量的醋酸（氨、乙二胺） 以克服拖尾现象。 问：如何判断极性？ （1）各官能团的极性顺序 （2）化合物的极性由分子中官能团的种类、数目、及排列方式等综合因素决定。 （3）溶剂的极性可根据介电常数 ε 的大小判断。 3. 聚酰胺： 属于氢键吸附，不但适用极性物质也适用于非极性物质的分离。 特别适合酚类、醌类、黄酮类、鞣质的分离。 吸附规律 ： 被分离物质与聚酰胺形成氢键的的数目越多，吸附力越强。 ①形成氢键的数目：越多，吸附力越强。 ②分子内氢键：被分离物质形成分子内氢 键的吸附力减弱。 ③芳香程度：分子中芳香程度化高者，吸 附力强。 4.大孔吸附树脂： 大孔吸附树脂是一种没有可解离基团具有大孔结构的高分子吸附剂。分为非极性与中等极性两类。 （1）吸附原理： 吸附性与分子筛原理相结合的分 离材料。 （2）影响因素： 大孔吸附树脂的特性、被分离物质 及溶剂的性质均影响着分离结果。 ①分子极性 极性大成分——易被极性树脂吸附，被分离 成分与大孔树脂形成氢键的基团越多，吸附力 越强，极性大的有机溶剂合适 。 极性小的成分——易被非极性树脂附，极性 小洗脱剂，洗脱能力强。 ②分子体积 对非极性大孔树脂而言，