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学科分类号
本科生毕业论文
题 目(中文):考马斯亮蓝法、银染法测定蛋白质纯度的对比研究
(英文): Coomassie brilliant blue and silver staining method to determine the protein purity of contrast research
学生姓名:
学 号: – 2014.05
2014年月
摘要 II
关键字 II
Abstract II
Key words II
1前言 1
1.1蛋白质、蛋白质纯度的简介 1
1.1.1 蛋白质的概述 1
1.1.2蛋白质纯度的概述 1
1.1.3蛋白质纯度测定的方法 2
1.2 考马斯亮蓝法的概述 2
1.3 银染法的概述 3
1.4 凝胶上蛋白染色进展 5
2 实验部分 5
2.1 仪器与试剂 5
2.2 溶液的配制 5
2.3 实验步骤 8
2.3.1 安装电泳模具 9
2.3.2 凝胶配制 9
2.3.2.1 凝胶配方 9
2.3.2.2 分离胶配制 10
2.3.3浓缩胶配制 10
2.3.4样品处理 10
2.3.5 上样 10
2.3.6染色 11
2.3.6.1考马斯亮蓝染色法 11
2.3.6.2银染法 11
2.3.7扫描凝胶 11
2.3.8清场 11
2.4 实验方法 11
2.4.1 两种染色法常规检验操作 11
2.4.2 两种染色法上样量相同 12
2.4.3 两种染色法的最低检查限 12
2.4.4 两种染色法的线性关系 12
3 结果与讨论 12
3.1 两种染色法常规检验操作分析 12
3.2 两种染色法上样量相同的结果对比 14
3.3 两种染色法的检查限的探索 15
4 结论 18
参考文献 19
致 谢 20
考马斯亮蓝法、银染法测定蛋白质纯度的对比研究
摘 要
采用– PAEG(十二磺基硫酸钠 – 聚丙烯酰胺凝胶电泳)的方法,对进行研究。– 聚丙烯酰胺凝胶电泳法的分离原理,是依据大多数蛋白质能与阴离子表面活性剂十二烷基磺酸钠(SDS)按重量比结合成复合物,使蛋白分子所带的负电荷远远超过天然蛋白质的净电荷,消除了蛋白质分子的电荷效应,以SDS – 聚丙烯酰胺凝胶为支持物,利用电荷效应、浓缩效应和分子筛效应来分离蛋白质[1]。其电泳迁移率仅反映蛋白质分子的大小。非还原型用于测蛋白质纯度。还原型是指在样品处理时加入还原剂,使蛋白分子去折叠,用于测定分子量。
比较SDS-聚丙烯酞胺凝胶电泳(SDS)中蛋白染色的2种方法。方法:将SDS中的蛋白分别用银染、考马斯亮蓝染色[2]。
关键字
SDS – 聚丙烯酰胺凝胶、电泳、蛋白质纯度、考马斯亮蓝法、银染法Studies on the Interaction between Sinomenine and DNA by Spectroscopy
Abstract
Using SDS - PAEG (12 sulfo sodium sulfate, polyacrylamide gel electrophoresis) method, the coomassie brilliant blue and silver staining method to determine the protein purity. Separation principle of SDS polyacrylamide gel electrophoresis method, is based on most proteins with anionic surfactant sodium dodecyl sulfate (SDS) by weight than combined into complex, the protein molecules with the negative charge is much higher than the net charge of natural protein, eliminates the protein molecule charge effect, with SDS - polyacrylamide ge
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