陈MPN陈苏宁最终版讲解.ppt

2015年2月，英国、德国、意大利、西班牙的多中心研究组报道了突变发生的先后次序对MPN患者临床表现的影响 对246例MPN患者筛选JAK2V617F和TET2基因突变（93个ET，107个PV，47个MF） 24例患者同时存在JAK2V617F和TET2基因突变（7个ET，107个PV，47个MF） 对上述24例患者长期观察（中位7.3年），多次分离不同阶段BMMNC行红系集落培养（BFU-E），并挑选7000个集落进行基因测序 N Engl J Med. 2015;372(7):601-12. N Engl J Med. 2015;372(7):601-12. N Engl J Med. 2015;372(7):601-12. 24例患者，分别有12例患者先发生JAK2V617F突变或TET2突变 与先获得TET2突变相比，先获得JAK2V617F突变的患者更多表现为PV（TET2为ET），血栓风险更高，突变祖细胞对卢可替尼的敏感性更高， * 总 结 MPN是一类以一系或多系髓系细胞(包括红系、粒系和巨核系)增殖为主要特征的克隆性造血干细胞疾病。 JAK2 V617F, MPL, CARL等突变基因的发现使人们对MPN发病机制的研究取得了突破性进展，不仅有助于对疾病做出正确诊断及预后评估，还提供了治疗的靶标，JAK2抑制剂已经在伴明显脾肿大的MF患者中显示出良好前景， Thanks for your attention! Passamonti等提出JAK2V617F基因突变发生过程：先出现0～50％的突变，之后进行克隆性增殖，其子代为V617F杂合子；杂合子HSC分裂重组产生V617F阳性纯合子子代，即出现50％～100％的突变。经克隆性增生纯合子细胞逐渐增多，杂合子细胞减少。PV在诊断时，JAK2V617F阳性细胞中位数为32％，提示杂合子和野生型细胞混合，随病程进展，杂合子细胞向纯合子细胞转化。因此，监测V617F百分率有助于监控PV的进展。 ET patients have median JAK2 V617F allele burden in the lower range and PV in the upper range, but this IS NOT a diagnostic criterion * JAK2基因定位于9p24，属胞内蛋白酪氨酸激酶家族。JAK2介导包括促红细胞生成素(EpoR)、血小板生成素(TpoR)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(G-CSFR)等多种细胞因子的信号转导， 促进或调节髓细胞生成。正常未刺激情况下，JAK2 保持非活化状态。一旦特异性配体与相应受体结合，JAK2信号活化，级联反应激活包括 MAPK,PI3K,STAT在内的下游蛋白。 该通路可被多种负反馈调节所抑制，包括酪氨酸磷酸酶，细胞因子信号抑制物suppressors of cytokine signaling (SOCS)，casitas B-lineage lymphoma (CBL), protein inhibitors of activated STATs (PIAS), LNK等。 JAK2分子共同结构包括7个高度保守的同源结构域(JAK homologydomain JH)，JH1可通过自身磷酸化使JAK2活化，JH2阻断JH1， 从而抑制JAK2的激酶活性。 V617F突变位点位于JH2结构域N端上方，为编码序列第1849位碱基由鸟苷酸变为胸腺嘧啶，导致其编码的第617位氨基酸由缬氨酸变为苯丙氨酸。当第617位缬氨酸被分子量较大的苯丙氨酸替代后，JH2空间结构不稳定，不能维持JH2区蛋白的正常折叠状态。使JH1活化环相互接近，从而造成JAK2激酶的持续活化，最终造成细胞的过度增殖. 鉴于95％以上的PV患者均发现JAK2 V617F突变，那么该突变阴性的少部分PV患者是否有类似的分子致病机制?通过对JAK2基因编码区的全面筛查，又发现了JAK2外显子12(JAK2 exonl2)突变。该突变在PV患者中约为3％，包括缺失、点突变等多种类型，主要为杂合突变。 * MPL是人血小板生成素(TPO)受体(TPOR)，属于造血因子受体超家族的一员。原发性血小板增多症患者的MPL表达过高而真性红细胞增多症患者和骨髓纤维化患者的MPL表达则显著下降。 MPL突变主要包括两种类型：W515L和W515K，约见于3％ET和10％PMF患者，突变同样造成下游信号通路的过度活化。 * * Calreticulin（CALR）是一种内质网上的钙离子结合蛋白，在真核生物中广泛存在和表达，它在内质网腔上主要有两个功能，分子伴侣功能和钙离子信号的介导。它能调控体内Ca2+ 平衡和内质网的Ca2+ 缓冲作用使其发挥多能性 *