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小针刀对兔骨折愈合实验医药学论文 1.1.2仪器东方红F30-IIF200maxX线摄片机（北京医用射线机厂生产）；AO-820组织切片机（美国生产）；400倍奥林巴斯光学显微镜（日本生产）；小针刀为汉章牌（北京华夏针刀医疗器械厂）；自制手锯；刺激器为调制成具有特定生理强度的干扰电流(自行设计)，其电学参数为8.0v，电流为9mA，频率恒定在4000Hz，电极用薄银片制成，大小为4mm×8mm，电极的一端焊有15cm的绝缘导线与刺激器连接。 1.1.3试剂乌拉坦、庆大霉素，均由湖南中医药大学动物实验中心提供。 1.2方法 1.2.1模型制备实验兔用25%乌拉坦4mL/kg耳缘静脉麻醉后，常规右前腿剪毛、碘伏消毒，铺无菌单，无菌条件下切开皮肤，分离肌肉、血管、神经等，暴露桡骨，于其中部用自制手锯横向锯成3.0mm的骨缺损骨折，骨折不固定，缝合皮肤，包扎伤口。术后庆大霉素4mg/kg肌注3d预防感染。 1.2.2分组与饲养造模后随机分成3组：实验组、空白对照组、干扰电流组，每组24只。所有兔子进行单笼并且统一由同一饲养员饲养。 1.2.3处理实验组术后第3天开始，在无菌条件下绕开皮肤切口以小针刀在骨折处前外侧用捣刺和骨膜刮动（每次每法治疗8下）进行刺激，每周2次，至第6周；空白对照组不做任何治疗，其它处理同另外两组；干扰电流组术后第1天开始以干扰电流在骨折断端远近两侧刺激兔子右前臂，1次/d，40min/次。 1.2.4外骨痂与骨折线评分及标本采集分别于术后第 7、1 4、28、42d分别处死各组中的6只兔，拍摄X线片后取骨折局部组织，10%福尔马林固定，乙酸脱钙，常规制成脱钙石蜡切片，HE染色观察。X线读片采用盲法，评价两项参数根据骨折愈合过程中外骨痂和骨折线的变化规律，将外骨痂和骨折线进行如下半定量[1]：（1）外骨痂可定量为：0分：外骨膜无反应；1分：外骨膜出现了反应；2分：外骨痂大小或密度较前明显提高；3分：外骨痂连在一起形成皮质骨桥；4分：外骨痂轻度吸收；5分：外骨痂明显吸收；6分：外骨痂接近完全吸收，骨折处皮质骨密度接近正常皮质骨；（2）骨折线可定量为：0分：骨折线清晰无变化；2分：骨折线开始变模糊；4分：骨折线模糊未消失，但出现较牢固的连接迹象；6分：骨折线已消失，骨折线被高密度的骨痂取代；8分：骨髓腔密度开始减低；10分：骨髓腔处密度明显减低；12分：骨髓腔完全再通，将上述两侧外骨痂和骨折线参数评分相加即为骨折愈合的X线评分。 1.2.5统计学分析各组数据以均数±标准差（ｘ±ｓ）表示，组间比较用完全随机设计方差分析，使用SPSS11.5进行统计分析。 2结果 2.1一般情况观察 术后动物精神状态、食欲及活动均良好，伤口愈合良好，无死亡，小针刀及干扰电流治疗顺利。 2.2小针刀对兔骨折外骨痂与骨折线X线片的影响 实验组7d（图1），骨折线模糊，骨膜反应明显，部分可见少量外骨痂；14d（图1），外骨痂量较多，骨折间隙密度增高，部分骨折线呈现较牢固连接迹象；28d（图1），外骨痂开始吸收，骨折线消失，被高密度的骨痂取代；42d（图1），外骨痂明显吸收，骨折处皮质骨密度接近正常皮质骨，骨髓腔完全再通。空白对照组7d（图1），骨折线清晰，骨膜反应轻；14d（图1），骨折线模糊，出现少量外骨痂，骨折线尚未出现牢固连接迹象；28d，大量的外骨痂，骨折线出现牢固连接迹象，但外骨痂无吸收；42d，骨折线消失，外骨痂开始吸收，髓腔未再通。干扰电流组照片情况和实验组大致相同。3组参数总的评分实验组和空白对照组有明显的差异（P0.05），但实验组与干扰电疗组无明显差异(P0.05)。见表1。 2.3组织学检查 ３组动物的骨折愈合都经历了血肿机化、纤维性骨痂、软骨性骨痂、骨性骨痂４个病理阶段。7d：实验组骨折断端间血肿被肉芽组织取代，大部分已经机化形成纤维组织连接，骨内外膜骨样组织增生；空白对照组，肉芽组织少，机化较差，血肿仍存在，断端骨内外膜软骨初现（图2）；干扰电疗组骨折断端血肿被肉芽组织取代，较多的纤维组织连接，骨内外膜骨样组织增生活跃。14d：实验组和干扰电流组骨折断端间纤维骨痂明显减少，软骨骨痂明显增多，边缘出现了钙化和骨化，骨外膜增生明显，出现大量软骨性骨痂并且出现部分骨小梁（图2）；空白对照组骨折断端主要以纤维骨痂为主，部分肉芽组织尚未完全被纤维组织取代，内外骨痂少，外骨痂较前两组薄。28d：实验组骨折断端可见大量骨小梁，并且骨小梁排列有一定方向性，且较规则，骨小梁周围出现一层排列整齐的骨母细胞，周边炎症细胞消失（图2）；空白对照组断端骨痂中仍有纤维组织和软骨化骨成分，炎症细胞仍然存在（图2）