第二章基因工程的酶学基础解析.pptVIP

主要内容 第一节 限制性内切核酸酶(Restriction Endonuclease,RE) 第一节 限制性内切核酸酶 限制(restriction)：指一定类型的细菌可以通过限制性内切核酸酶（限制酶）的作用，破坏入侵的噬菌体DNA，导致噬菌体的寄主幅度受到限制。维护宿主遗传稳定的保护机制。 第一节 限制性内切核酸酶 限制酶：在细胞内能够识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列，并对DNA分子进行切割的一种酶。 1978年，W. Arber，H.O.Smith，Nathans因发现限制性内切酶及对其功能研究的突出贡献获得诺贝尔生物医学奖。 第一节 限制性内切核酸酶 修饰(modification)：指寄主本身的DNA，由于在合成后通过甲基化酶（甲基转移酶）的作用得以甲基化，使DNA得以修饰，从而免遭自身限制酶的破坏。 第一节 限制性内切核酸酶 寄主控制的限制与修饰的作用：一是保护自身的DNA不受限制；二是破坏外源DNA使之迅速降解。 基因工程中，应用采用缺少限制作用的菌株作为受体。 例如K12： rk+mk+ 　 rk-mk- （用于转化实验） rk-mk+（用于转化实验） rk+mk-（自杀性表型） 第一节 限制性内切核酸酶 根据限制性内切核酸酶的识别切割特性、催化条件及是否具