第六章分子生物学研究法解析.pptVIP

第三节 蛋白质及RNA相互作用技术 4. 细胞内蛋白质相互作用研究——荧光共振能量转移法（FRET） FRET荧光能量转移有三个基本条件： 给体与受体在合适的距离（1～10 nm）； 给体的发射光谱与受体的吸收光谱有 一定的重叠（这是能量匹配的条件）； 给体与受体的偶极具有一定的空间取 向（这是偶极-偶极耦合作用的条件）。 * * * * 第三节 蛋白质及RNA相互作用技术 5. RNAi（RNA干涉）技术及其应用 RNAi技术利用双链小RNA高效、特异性降解 细胞内同源mRNA从而阻断靶基因表达，使细胞出现靶基因缺失的表型。RNAi的命名来源于安德鲁·法尔1998年在《自然》杂志上的 论文。 研究发现，双链RNA是RNAi的触发物，引 发与之互补的单链RNA（ssRNA, single- stranded RNA）的降解。 经过Dicer（一种具有RNAase III活性的核酸 酶）的加工，细胞中较长的双链RNA（30个核苷酸以上）首先被降解形成21～25个核苷 酸的小分子干扰核糖核酸（siRNA，short interfering RNA ），并有效定位目标 mRNA。 * * * * * * RNAi作用机 制示意图。 第三节 蛋白质及RNA相互作用技术 5. RNAi（RNA干 涉）技术及其应用 siRNA是引发转录后基因沉默中序列特异性 RNA降解的重要