第二章菌种选育解析.ppt

第二章 菌种选育、保藏与复壮 重点、难点： 重点内容： 第一节 菌种选育 菌种选育： 由于自然的或通过人工的方法使微生物发生变异，再通过识别、分离、筛选得到具有更优良性状的高产菌株的过程。 一、微生物菌种选育的理论基础 基础知识 微生物学、遗传学 、生物化学 （一）微生物的遗传和变异 遗传： 变异： 微生物的遗传和变异的特点： （1）微生物繁殖快，生活周期短 ，变异了的个体可以迅速表现出来； （2）微生物由于个体小，其比表面积大，易于引起细胞变异； （3）微生物大多以无性繁殖或以无性繁殖为主，而且营养体多数为单倍体，便于建立纯系 。 微生物的变异包含稳定性变异和不稳定性变异 稳定性变异：不能回复到变异发生前的状态 ； 不稳定性变异：当环境恢复到正常状况时，其形态和特性又能恢复原状，是暂时的。 （二）遗传和变异的物质基础 1、研究历史 1866年，Mendel的试验——豌豆杂交试验 1910年，Morgan的果蝇试验——确认遗传因子—基因 1897年，Miescher 发现核酸，但没有认识到其重要意义。 微生物遗传学的三个经典实验——细菌转化实验 　　　　　　　　　　　　　　　草花叶病毒的拆和实验 　　　　　　　　　　　　　　　噬菌体感染实验 遗传的物质基础------核酸(DNA,RNA) 2、遗传物质的分子结构和化学组成 （1）遗传物质的化学组成 核酸 核苷酸 （2）遗传物质分子结构 DNA的双螺旋结构。碱基互补，对应。 （3）DNA的复制 半保留复制。 单细胞细菌只具有一个DNA分子， 细胞分裂一次，DNA就复制一次。 3、遗传物质在细胞中的存在形式 真核生物，遗传物质在染色体上。 原核生物，拟核，DNA分子呈裸露状态。 质粒， 基因与染色体， 二、自然选育 自然选育： 　　　它是利用微生物在一定条件下产生自发变异，通过分离、筛选，排除劣质性状的菌株，选择出维持原有生产水平或具有更优良生产性能的高产菌株。 自然选育是发酵生产中经常性工作。为什么？ 　　　由于自发突变的正突变率很低，多数菌种产生负变异，其结果是使生产水平不断下降。因此，在生产中需要经常进行自然选育工作．以维持正常生产的稳定．选育高产菌种不是自然选育的主要目的。 （一）菌种退化变异的原因 1、遗传基因型的分离 遗传基因型的分离？ 有何表现？ 2、自发变异的产生 3、人工诱变导致的退化变异 （二）自然选育的目的和适应条件 目的： 保持菌种优良性状的稳定性； 保持菌种的纯度； 将具有高产性状的微生物从混杂的群体中分离出来，建立高产菌株占优势的群体。 适应条件（什么情况下进行自然选育）： 长期保存时，使菌种尽可能纯化； 菌种选育时，及时自然分离，得到稳定的高产菌株。 （三）自然选育的方法 自然选育步骤： 1．通过表现形态来淘汰不良菌株 2．通过目的代谢物产量的考察 3．进行遗传基因型纯度试验，以考察菌种的纯度 4．传代的稳定性试验 具体方法与操作？ （试剂药品、仪器设备、操作方法） 可以干活了！ 三、诱变育种 诱变育种： 是指人为地、有意识地将对象生物置于诱变因子中，使该生物体发生突变，从这些突变体中筛选具有优良性状的突变株的过程。 20世纪40年代开始诱变育种，获得青霉素高产变异菌株。 目前仍是一种比较经济、高效的育种方法。因为：一是对生物调控机制还了解不够透彻；二是基因工程的方法耗费大。 （一）突变 突变： 从生物表型上说是突然发生的可遗传的变化，这种变化就称为突变。带有这种变化的菌株称为突变菌株。 突变包括基因突变（点突变或微小损伤）和染色体畸变两大类。 自然突变或自发突变：在自然状况下发生的突变。 诱发突变：在人为地用物理或化学因素诱发的突变。 （二）诱变的基本原理 诱变剂： 用来处理微生物并能提高生物体突变频率的物理或化学因素，称为诱变因索，又称诱变剂。 三类：物理、化学、生物诱变剂。 2、诱变剂作用机理 诱变剂作用机理各不相同，诱变效果也不同。 （1）物理诱变剂 快中子、60Co、γ-射线、β-射线----电离辐射。 引起染色体倒位、易位、缺损、重组及其他畸变。 紫外线-----不形成离子的非电离辐射 (最常用 )。 紫外线对生物诱变最有效的波长是------200~300nm，其中260nm左右作用最大。 胸腺嘧啶(T)二聚体的形成是紫外线引起细胞突变的主要原因 ,改变了正常的配对，破坏了腺嘌呤(A)的正常掺入作用。复制就会在这一点上突然停止或错误地进行。 图2—3 ，图2—4 。 光复活作用 ： 紫外线照射后造成的DN