第六章原核生物基因表达调控解析.ppt

分子生物学基础 第六章 原核生物基因表达调控 第一节 概述 生物的遗传信息以基因为基本单位，储存在细胞内的DNA分子的核苷酸序列中。个体发育的过程中，有序地将储存的核苷酸序列信息通过密码子—反密码子系统，转变成蛋白质分子，执行各种生理生化功能，完成生命的全过程。 将遗传信息从DNA转变为表现生命活性的蛋白质分子的全过程就是基因的表达过程，对这个过程的调节、控制称为基因表达调控。 第一节 概述 一、原核基因表达调控的特点 1．基因的可调控性 2．基因表达与环境关系密切 二、降解物对基因活性的调节 1．降解物抑制作用 葡萄糖存在时，即使培养基中加入乳糖、半乳糖、阿拉伯糖等糖类物质，也不会诱导出相应的糖类物质吸收、代谢的酶，这种现象称为葡萄糖效应，也称为降解物抑制作用。 明显的这种效应的出现与葡萄糖的存在直接相关。菌体内，葡萄糖通过降低cAMP（环一磷酸腺苷）的浓度水平，阻止应答cAMP和其受体蛋白——分解代谢物激活蛋白（catabolite activator protein，CAP）的基因表达（图6-1）。乳糖等其它糖类物质的代谢酶基因多数是可以应答cAMP-CAP复合物的基因。 第一节 概述 第一节 概述 2．cAMP-CAP复合物与基因结合调节其表达活性 CAP由相对分子量为22.5kD的两个亚基聚合而成，可被cAMP激活，形成cAMP-CAP复合物与DNA的特殊序列识别、结合。在一些基因的启动子序列上分离到cAMP-CAP复合物，表明了这种复合物可以促进基因的转录。 图6-1 降解物抑制作用cAMP-CAP复合物中的CAP是DNA结合蛋白，结合于启动子区域，如乳糖操纵子的启动子中五个碱基的反向重复序列（图6-2）。结合位点多数位于转录起始位点上游-23~-50bp处，中心区位于-41bp处，左端的序列保守性强，命名为Ⅰ区，右端的序列保守性较差，是为Ⅱ区，由于Ⅱ区的序列有较大的变动，使得不同基因对CAP的应答强弱有所不同。 第一节 概述 三、弱化子对基因活性的影响 1．弱化作用（attenuator） 氨基酸的合成途径所需酶的基因，其编码产物上游常出现另外一段编码序列，称为前导序列，这段序列的功能是调节其下游基因的表达。此调节方式中，由特殊负载的氨酰—tRNA提供调节信号，如Trp—tRNATrp的浓度是调节色氨酸合成酶基因表达的信号，当其浓度较高时，前导序列二级构象发生变化，形成终止子结构，终止转录，这段前导核苷酸序列称为弱化子或衰减子（attenuator），这种降低基因表达的方式称为弱化作用（attenuation）。 弱化子位于启动子和下游的结构基因之间（图6-3）。当色氨酸存在时，RNA聚合酶渗漏表达色氨酸合成酶基因；当色氨酸浓度降低，解除转抑制和终止作用，色氨酸合成酶基因的表达量可增强700倍。 第一节 概述 第二节 原核基因表达的调控 一、转录水平的调控 原核生物转录水平调控的经典模型是操纵子模型，该模型提出一个调控区域控制连锁在一起的多个基因的转录。 细菌基因组中，相关基因串联在一起，形成一个基因簇，编码同一代谢途径中不同的酶，它们是一个多顺反子，共同转录、共同调控，构成表达、调控的单元，称为操纵子（operon），由启动子、转录控制区、结构基因（structural gene）组成的一个转录单位（图6-5）。基因组中存在的基因根据其产物功能不同可以分为两种类型，编码细胞结构、基本代谢所需的蛋白或RNA的称为结构基因，编码可以控制其它基因表达的蛋白或RNA的基因则称为调控基因。操纵子模型中，由转录控制区应答调控基因所表达的调控因子的作用，决定下游的结构基因是否表达。 第二节 原核基因表达的调控 第二节 原核基因表达的调控 1．正调控和负调控 原核生物转录水平的基因调控，具有正调控和负调控的两种方式。调控因子作用于靶序列，引起靶序列附近基因转录水平的变化，激活蛋白的作用使得转录水平上升，是正调控（positive regulation）；阻遏蛋白的作用使转录水平下降，是负调控（negative regulation）。 调控蛋白应答小分子效应物的作用，分为可诱导（inducible）和可阻遏（repressible）两种效应，激活蛋白和阻遏蛋白都可以应答小分子效应物的诱导和阻遏效应。因此，原核生物的操纵子有四种应答方式，分别为：可诱导的负调控、可诱导