8 吸光光度法.pptVIP

* 可构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光，再入射到阵列式接受器上的全部波长的信号，然后，对二极管阵列快速扫描采集数据，得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。 * 本身无颜色，但会影响有机试剂及其与金属离子的反应产物的颜色，它们称为助色团。 * 透光度T（A）的读数范围为：T%=10%~70%， A=1.0~0.15 ＊ 光源 (钨灯、氢灯、氘灯） 能发射紫外光区或可见光谱区的连续光谱； 足够的辐射强度、稳定性较好、使用寿命较长 基本要求 : 常用的光源 : 可见光区: 钨灯 (辐射波长为320nm~2500nm) 紫外区: 氢灯、氘灯(辐射波长为185nm~400nm) 三. 仪器和方法 ＊ 单色器 作用 : 将光源发射的复合光分解成单色光的光学系统 1. 滤光片----光电比色计的单色器 选择的原则：滤光片最易通过的光是有色溶液 最易吸收的光 组成：由有色玻璃制成 作用：只允许和它颜色相同的光通过，得 到的是近似的单色光 互补色 （滤光片、棱镜或光栅） 三. 仪器和方法 组成 : 入射狭缝：光源的光由此进入单色器 准光装置：透镜或反射镜使入射光成为平行光束 聚焦装置：将分光后的单色光聚焦至出射狭缝 （透镜或凹面镜） 色散元件：将复合光分解成单色光 2. 棱镜或光栅 ----分光光度计的单色器 由棱镜或光栅等色散元件及狭缝和透镜等组成 三. 仪器和方法 入射狭缝：光源的光由此进入单色器 准光装置：透镜或反射镜使入射光成为平行光束 聚焦装置：(透镜或凹面镜）将分光后的单色光聚焦至出射狭缝 色散元件：将复合光分解成单色光 光栅和棱镜分光原理 光栅分光 棱镜分光 平面玻璃或金属片：刻有大量平行等宽、等距狭缝(刻线) 光栅的每条刻线都产生衍射作用，衍射光互相干涉产生干涉条纹。不同波长的入射光产生干涉条纹的衍射角不同（长波长衍射角大），从而将复合光分成不同波长的单色光。 入射光在棱镜的两界面上发生折射而色散。单色光的纯度取决于棱镜的色散率和出射狭缝的宽度。 单色器获得单色光的半宽度： 棱镜: 5~10nm 光栅: 0.1nm ＊ 样品室 用于放置各种类型的吸收池(比色皿)和相应的池架附件 （石英池和玻璃池） 三. 仪器和方法 厚度(光程): 0.5, 1, 2, 3, …cm 石英或玻璃池，紫外区一定要用石英池 ＊检测系统 光电管或光电倍增管 将光强度转换成电流来进行测量。光电检测器。 要求：对测定波长范围内的光有快速、灵敏的响应， 产生的光电流应与照射于检测器上的光强度成正比。 (1)光电管 三. 仪器和方法 (2)光电二极管阵列 通过测量整个波长范围内光强的变化得到吸收光谱。 可构成多通道并行工作，同时检测全部波长的信号，然后，对二极管阵列快速扫描采集数据，得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。 三. 仪器和方法 ＊显示器 由检流计、数字显示、微机组 成的自动控制和结果处理系统 三. 仪器和方法 四、显色反应和显色条件的选择 1.显色剂作用 2. 显色反应的选择 3. 影响显色反应的因素 4. 显色剂的分类 1.显色剂作用 无色或浅色 试样 有色物 +显色剂 比色 显色反应 配合反应 氧化还原反应 缩合反应 重氮化—偶氮化反应 四、显色反应和显色条件的选择 2.显色反应的选择 灵敏度高 ε=104－105 (2) 选择性好 (3) 有色物组成恒定，化学性质稳定 (4) 显色剂在测定波长处无明显吸收 对比度=λmax有色物 -λmax显色剂＞60nm 四、显色反应和显色条件的选择 3.影响显色反应的因素 (1) 显色剂用量 根据吸光度A与显色剂浓度cR的关系来确定 cR选择——引起A变化最小处的cR（即曲线平坦处） M + R MR 四、显色反应和显色条件的选择 例： Fe(ssal)+ 紫红色 pH=1.8~2.5 pH=4~8 Fe(ssal)-2 橙红色 pH=8~11.5 Fe(ssal) 3 3- 黄色 （3）显色时间和温度 由实验得出 （4）溶剂 一般选择水作溶剂 (2) 显色溶液的pH值 测定不同pH值下，显色溶液的吸光度A，以A为纵坐标，pH为横坐标，制图。 选择曲线平坦处pH 四、显色反应和显色条件的选择 (5) 共存离子的干扰 可能存在的几种情况： 本身有颜色 与显色剂反应生成有色物 消除的方法： 四、显色反应和显色条件的选择 共存离子 加入配位掩蔽剂或氧化还原掩蔽剂 使干扰离子生成无色配合物或无色离子 选择适当的显色条件以避免干扰 用磺基水杨酸测定Fe3+离子时,Cu2+与试剂形成黄色络合