动物病理生理学实验设计之肝性黄疸讲解.pptVIP

肝性黄疸 组员： - 查资料 - 制作 - 解说 实验目的 实验原理 实验方法 5 6 实验器材与药品 实验动物 实验结果预测 实验目的 实验原理 实验方法 5 6 实验器材与药品 实验动物 实验结果预测 实验目的 ·复制肝性黄疸病理模型 ·了解胆色素代谢的变化 ·观察黄疸的表现 实验原理 ·黄疸（jaundice）:在正常的动物机体内，胆红素 的生成、结合和排泄三个主要环节上保持着动态平衡，但当其中任何一个环节发生障碍，都会使胆红素在血清中浓度升高，造成高胆红素血症，使机体的皮肤、粘膜、巩膜、体液及实质器官发生黄染的病理过程。 ·胆红素在肝内的代谢过程，包括肝细胞对血液内胆红素的摄取、结合和排泄三个相互衔接的过程，由肝脏对胆色素的处理能力下降所引起的黄疸称为肝性黄疸（hepatic jaundice），此类黄疸的发生于肝功能障碍有关。 ·新生霉素能抑制BGT（胆红素葡萄糖醛基转移酶）活性、阻碍酯化的进行，使肝细胞对胆红素转化障碍，导致（肝性）黄疸。 实验动物 体重相仿的小白鼠2只 ·5ml注射器、试管、试管架、离心管、离心机、移液管、一般手术器材 ·150mg新生霉素、生理盐水、重氮试剂、95%酒精、各种浓度重铬酸钾溶液标准管 实验器材与药品 ·实验前处理及病理模型复制 ·实验检查 实验方法 （1）实验前两天给小鼠禁水 （2）实验前一天将0.1g新生霉素溶100ml 水中并将其加入实验组小鼠的饮水，对照组小鼠回复正常饮水。 （3）实验前一天将50mg新生霉素溶于5ml水中配成新生霉素溶液，给实验组小鼠注射两次，每次1ml，剩余保存留用。对照组小鼠注射等量的生理盐水。 （4）给实验小鼠注射1ml新生霉素溶液，造成肝细胞损伤。对照组小鼠注射等量的生理盐水。 实验前处理及病理模型复制 （1）观察记录动物的一般状态和巩膜，口腔黏膜，耳及皮肤的颜色。 （2）摘除眼球采血1-1.5ml，放入干燥离心管内，凝血后离心（2000/分），分离血清，进行胆红素定性和黄疸指数检查。  实验检查 ·原理 胆红素与重氮试剂作用发生重氮反应，形成红色的重氮胆红素。因血浆中的结合胆红素可以溶于水，与重氮试剂作用后呈现红色，称为直接反应阳性；游离胆红素因不能与重氮试剂直接作用，故呈阴性反应，但加乙醇后游离胆红素则能与重氮试剂作用，呈现阳性反应，称为间接反应阳性。 胆红素定性一凡登白实验 ·方法 取血清0.2ml放入小试管内，沿管壁加入新配制的重氮试剂0.5ml，立即计时和进行观察。若在30s-10min内试剂与血清交界处出现紫红色环，为直接反应阳性；若经10min仍不显色，而加入95%酒精0.2ml后才显色者，则为间接反应阳性。 胆红素定性一凡登白实验 ·重氮试剂配制 甲液：取对-氨苯磺酸1g，浓盐酸15ml，加蒸馏水至1000ml。 乙液：取50%亚硝酸钠液（亚硝酸钠25g，加蒸馏水至50ml时，置冰箱中保存）0.5ml，再加蒸馏水50ml，此液可用1周。 临用前，取甲液5ml，加乙液0.15ml混合，在3h内有效。 。 胆红素定性一凡登白实验 ·原理 血清黄色的深浅与胆红素含量有关。临床检验规定0.01%重铬酸钾溶液的色度作为黄疸指数1，将血清用生理盐水稀释，肉眼观察其黄色深度与0.01%重铬酸钾溶液相当时，血清的稀释倍数即为该血清的黄疸指数。 黄疸指数测定 ·方法 取血清0.1ml置于小试管内，所用试管应与标准管口径及厚度一致，用1ml吸管吸取生理盐水溶液稀释血清，当与某一标准管的颜色相同时，计量所用生理盐水毫升数，再按公式求出黄疸指数单位： 所用生理盐水毫升数 + 0.1 黄疸指数= ×标准管单位 0.1 黄疸指数测定