涎腺粘液表皮样组织中芳香化酶与增殖细胞核抗原的表达及相互关系.pdfVIP

中文 摘 要 涎腺粘液表皮样瘤组织中芳香化蔺与增班细胞核抗 原的表达及相互关系 摘 要 目的:涎腺粘液表皮样癌(mucoepidermoidcarcinoma, MEC)在涎腺恶性肿瘤中比较常见，约占所有涎腺肿瘤的 12%，涎腺恶性肿瘤的30%。组织病理学上可分为高分化型、 中分化型和低分化型，随分化程度的降低肿瘤的恶性程度升 高。目前，涎腺MEC的治疗以手术切除为主。性激素依赖性 肿瘤内分泌治疗的成功为涎腺MEC的治疗提供了新思路。近 年来研究表明，涎腺ME C组织中存在雌激素受体，性激素代 谢紊乱可能与涎腺MEC的发生、发展有关。雌雄激素的转化 中，细胞色素P450芳香化酶(CytochromeP450aromatase)起着 关键的作用，它能够催化雄激素转化为雌激素，并调节各种 雌雄激素的功能。 增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA) 常作为测定细胞增殖水平的指标，其在细胞核内阳性表达的 高低与细胞增殖活性密切相关，通过检测肿瘤细胞的PCNA， 可了解和评价肿瘤组织的增殖活性。在人的乳腺癌组织中， 芳香化酶与PCNA的表达存在明显的相关性，肿瘤组织局部 经由芳香化酶催化而来的雌激素对肿瘤细胞的增殖起了重要 的作用。 本研究采用免疫组织化学方法，对涎腺粘液表皮样癌组 织和正常涎腺组织中芳香化酶及PCNA的表达与免疫定位进 行研究，旨在探讨芳香化酶在涎腺ME C中的作用及其与肿瘤 中丈 摘 要 细胞增殖的关系，并为临床上采用芳香化酶抑制剂治疗涎腺 MEC提供参考。 方法:选取存档的经福尔马林固定、石蜡包埋的40例涎 腺MEC组织和17例正常涎腺组织标本，分为实验组 (MEC 组)和对照组 (正常组)，将每个蜡块切为4-5um的切片， 共切4张，1张ICE染色，1张作为阴性对照，其余2张分别 行芳香化酶和PCNA染色。方法如下:石蜡切片常规脱蜡至 水;5%践02甲醇振洗25分钟，以封闭内源性过氧化物酶活 性;微波抗原修复，92-980CX15分钟，室温冷却;正常山羊 血清封闭，37`C孵育30分钟;倾去血清，滴加一抗，4℃过 夜;滴加生物素化二抗，370C孵育25分钟;滴加辣根酶标记 的链酶卵白素，370C孵育20分钟;最后DAB显色，苏木素 复染，脱水、透明、封片。除血清封闭步骤外，以上各步后 均以PBS振洗5分钟X3次。用己知PCNA和芳香化酶阳性 的乳腺癌标本作为阳性对照;以PBS代替一抗作为阴性对照。 芳香化酶以细胞胞浆中出现淡黄到棕黄色细颗粒状物 质，着色高于背景底色为阳性，无阳性细胞为阴性。 PCNA 以细胞核内出现棕黄色颗粒，着色高于背景底色 为阳性。分级标准:每例切片在 (40OX)光镜下选取5个有 代表性的视野，按阳性肿瘤细胞数/所计肿瘤细胞数X100%, 算出阳性细胞百分比，即增殖指数 (proliferatingindex,PI)。 采用半定量法，按PI为0%为阴性(十)、1%^25%为弱阳 性(+)、26%-50%为中度阳性(++)、50%为强阳性(+ ++)分级。 所有数据经SPSS11.5统计软件处理完成。组间指标表达 率的比较与指标间关系的比较用卡方检验，必要时采用Fisher 一-~~，分~~-~门-~，分~，~~~~分~~~--~~~，~分~目~~~~~，~~~~~~~~~~~~~~户~，一一 . z 中文 摘 要 确切概率法;组间指标表达强度的比较用等级分组资料的秩 和检验。 结果 1芳香化酶的表达 1.1涎腺ME C组和正常涎腺组均有芳香化酶的表达。芳香化 酶在MEC组主要在粘液样细胞表达，阳性率为55%(22/40); 在正常组主要在腺泡细胞表达，阳性率为 17.65% (3/17)。 两组间芳香化酶的阳性率有显著性差异 (P0.05) 1.2不同性别患者的涎腺MEC组织中芳香化酶的阳性率无明 显差异 (P0.05)。 1.3不同涎腺来源的ME C组织中芳香化酶的阳性率无明