糖尿病对大鼠牙组织、白细胞介素-6表达及血清超敏C反应蛋白水平的影响.pdfVIP

硕士学位论丈 糖尿病对大鼠牙周组织、白细胞介素．6表达 及血清超敏C反应蛋白水平的影响 硕士研究生：王小娟 导师：章锦才教授 摘要 研究背景 糖尿病是一种系统性疾病，由于糖类，脂肪代谢不良导致高血糖和高血脂； 牙周组织疾病是发生在牙周支持组织(牙龈、牙周膜、牙槽骨)的一种破坏性 疾病，最终会导致牙齿缺失。尽管存在一些争议，关于糖尿病和牙周组织疾病 的一些相关关系已经被很多学者报道，因此将牙周组织疾病列为糖尿病的第六 大并发症，糖尿病和牙周组织疾病之间的双向关系也成为众多学者关注的热点。 临床观察证明，糖尿病患者牙周疾病患病率增高，严重性增加，并且其菌斑指 数、牙龈指数、牙周袋深度、牙周附着丧失及牙槽骨吸收程度均高于健康人， 可能是牙周疾病发展过程中的一个重要的危险因素；动物实验中，在引入外界 刺激因素的情况下，如丝线结扎，菌斑接种等，牙周组织骨丧失在糖尿病大鼠 中明显加重，而无外界刺激因素时糖尿病对大鼠牙周组织的影响尚未见明确详 细报道。本论文主要研究在没有外界刺激因素的情况下，糖尿病对SD大鼠牙周 组织及对炎症因子如白细胞介素．6和超敏C反应蛋白的影响。 目的： (1)建立2型糖尿病SD大鼠模型； (2)比较不同时间点，正常对照组大鼠和糖尿病模型组大鼠牙周组织情 况； (3)比较不同时间点正常组SD大鼠和模型组大鼠颌骨和股骨骨组织X 中文摘要 线结构； (4)比较不同时间点光镜下正常组SD大鼠和模型组大鼠骨组织结构； (5)比较正常组和模型组大鼠骨组织IL．6免疫组织化学结果； (6)比较正常组和模型组大鼠血清超敏C反应蛋白水平。 方法： 1．SD大鼠随机分为正常对照组和STZ致糖尿病模型组，对照组8只，模型 组30只。模型组大鼠高热量饲料喂养1个月后，造成肥胖模型，然后一次性静 正常对照组大鼠使用普通饲料喂养1个月后，一次性静脉注射0．1mol／L，pH4．5 相同剂量的柠檬酸缓冲液：监测尿糖血糖改变情况，尿糖卅，血糖值 之l1．2mmol／L，该指标至少持续2周的实验动物作为成功的糖尿病大鼠模型。 分别于实验开始第6，10，12，16周后，随机选取大鼠称取体重，每次对 离心15分钟，取血清，分装保存于．70℃超低温冰箱。取上下颌骨及双侧股骨， 一侧股骨置于4％福尔马林液固定备用，另一侧置于．70。(2低温冰箱保存。 2．牙周附着情况：大鼠麻醉后，观察牙龈色、形、质改变及牙龈退缩情况， 牙周探针探查大鼠牙周情况。 3．骨组织X线观察：去除颌骨及股骨上的神经肌肉，暴露完整的骨组织， 在数字化牙片x光机上拍摄骨组织的X线片，工作条件：电压63Kv，电流8mA， 曝光时间0．080s。 4．骨组织形态学观察：经4％福尔马林液固定24小时后，取一半颌骨及一 侧股骨，口腔科慢速涡轮机沿股骨长轴及颌骨近远中方向制备成5mm厚的骨块， 将骨块进行石蜡包埋，股骨标本沿长轴制备5—7um切片，颌骨标本制作为近远 中方向为50啪的切片，HE染色。 5．大鼠骨组织IL．6免疫组织化学：糖尿病大鼠骨组织石蜡切片按常规脱蜡 复水，双氧水灭活内源性过氧化物酶，枸橼酸盐缓冲液进行热抗原修复，5％牛 Ⅱ 硕士学位论文 恒温箱孵育--d,时左右；加生物素化山羊抗鼠IgG，放于37℃恒温箱孵育20分 钟；加SABC，37℃恒温箱孵育20分钟；DAB显色5．30分钟，光镜下观察。 6．大鼠血清超敏C反应蛋白的测定：采用免疫散射比浊法，按照说明书编 辑参数，测定结果。正常值为0lmg／L。 结果： 1．从血糖测定结果及尿糖监测结果看，SD大鼠静脉一次性注射链脲佐菌素 可成功的建立二型糖尿病大鼠模型，在整个实验过程中模型组除2只SD大鼠外， 其它动物在给药后血糖尿糖均有明显改变，模型组动物在注射链脲佐菌素后一 周尿糖增高为卅，血糖均高于11．2mmol／L。 2．牙周组织探查结果：整个实验过程中，正常对照组和