纯钛表面不同处对骨髓间充质干细胞矿化的影响.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………………4 研究论文纯钛表面不同处理对骨髓间充质干细胞矿化的影响 前言………………………………………………………………………………………………99月U舌……………………………………………………………………………………………… 材料与方法………………………………………………………………………10 结果……………………………………………………………………………………………．17 附图……………………………………………………………………………………………．20 附表……………………………………………………………………………………………．35 讨论……………………………………………………………………………………………．35 结论……………………………………………………………………………………………．40 参考文献………………………………………………………………………4l 综述口腔种植体表面粗化对骨结合的影响…………………………………．43 致谢……………………………………………………………………………………………………53 个人简历………………………………………………………………………54 中文摘要 纯钛表面不同处理对骨髓间充质干细胞矿化的影响 摘 要 目的：钛金属具有优良的理化性能，生物相容性好、耐腐蚀，成为口 腔种植体的主要材料。目前研究发现，纯钛表面的形貌特征是影响骨结合 的重要因素，它可以影响细胞的黏附、增殖和分化，进而决定了纯钛与骨 界面的结合速率，纯钛表面形貌对提高种植的成功率有至关重要的作用。 研究表明，钛表面粗化处理可明显提高种植体的骨结合率，粗化处理已经 成为钛表面改性的一个重要的研究方向。喷砂酸蚀的表面优化处理方法能 提高纯钛表面的粗糙度，从而提高纯钛表面与周围骨组织的骨结合率，提 高种植的早期稳定性。骨髓间充质干细胞是一种具有增殖和分化潜能的多 能干细胞，种植体植入后，其在种植体表面附着、增殖、分化、矿化，直 接影响着种植体骨整合的形成。目前已有研究观察了骨髓间充质干细胞在 不同处理的纯钛表面的附着特点，但有关骨髓间充质干细胞在不同处理的 纯钛表面增殖、矿化的研究尚不多见。本实验通过不同方法对钛片表面进 行处理，制备出具有不同特征的粗化纯钛表面形貌，通过体外实验来观察 不同处理纯钛表面对骨髓间充质干细胞附着及矿化的影响，探讨有利于促 进纯钛表面矿化形成的纯钛表面处理方式，从而为临床种植体的开发提供 更为准确而可靠的实验依据。 方法： l钛片的制备及分组 0．8p 选取直径10mm，厚度lmm纯钛片15枚，Ram，分为3组， 每组5枚。 气压下进行表面粗化，HCl／H2S04混合液酸蚀； 5Kp气压下进行表面粗化，HCl／H2S04混合液酸蚀； C组(光滑组)：表面不做任何处理。 2不同处理纯钛表面形貌的扫描电镜观察 中文摘要 砂粒喷砂HCl／H2S04双重酸蚀组钛片和光滑组钛片的表面形貌。 3骨髓间充质干细胞分离、培养与鉴定 和胫骨内骨髓间充质干细胞，采用密度梯度离心法进行分离和纯化，常规 原代及传代培养。通过Vimentin免疫细胞化学染色对细胞进行鉴定。 4不同处理纯钛表面骨髓间充质干细胞的培养及矿化诱导 将第2代生长良好的骨髓间充质干细胞制备成单细胞悬液，分别滴加 到3组不同处理的纯钛表面以及作为空白对照的玻片表面进行培养。同 时，加入诱导矿化剂对各组表面的细胞进行诱导。 5不同处理纯钛表面骨髓间充质干细胞诱导培养后的生长情况和矿 化结节的形态的扫描电镜观察 诱导培养11天后扫描电镜下观察各组钛片表面骨髓间充质干细胞细 胞的生长情况及矿化结节的形态。 6矿化结节的鉴定 通过茜素红、硝酸银染色对诱导后形成的矿化结节进行鉴定。 7矿化结节的计数 体