阿利吉仑、厄贝沙坦、氨氯地平对动脉粥样硬化合并肾动脉狭窄大鼠抗炎症性肾脏保护作用的对比的分析.pdf

目 录 阿利吉仑、厄贝沙坦、氨氯地平对动脉粥样硬化合并肾脉 1 狭窄大鼠抗炎症性肾脏保护作用的对比研究……………1 1.1 中文摘要……………………………………………………1 1.2 英文摘要……………………………………………………5 1.3 前言…………………………………………………………12 1.4 材料与方法…………………………………………………16 1.5 结果…………………………………………………………29 1.6 讨论…………………………………………………………39 1.7 结论…………………………………………………………47 1.8 参考文献……………………………………………………48 1.9 英汉缩略词对照表…………………………………………54 2 致谢…………………………………………………………55 3 Fractalkine/CX3CR1 与动脉粥样硬化 （综述） ………………………………………………………………56 阿利吉仑、厄贝沙坦、氨氯地平对动脉粥样硬化合并肾动 脉狭窄大鼠抗炎症性肾脏保护作用的对比研究 摘 要 背景及目的：由于人口老龄化以及不良生活方式，在肾动脉狭窄病因 中，动脉粥样硬化所占比例增至71.9%，最终导致终末期肾脏病（end stage renal disease，ESRD）。研究发现动脉粥样硬化所致肾动脉狭 窄程度与肾损害严重程度并非完全平行；推测动脉粥样硬化所致肾动 脉狭窄慢性肾损害可能是由血管狭窄以外的其他因素所致，炎症反应 可能是肾损害进展的重要机制之一，且发现动脉粥样硬化斑块稳定性 与肾损害严重程度有密切关系。不规则趋化因子（Fractalkine，FKN） 是具有粘附活性的趋化因子，参与白细胞特别的游走和活化。内皮细 胞释放的趋化因子FKN 与其受体CX3CR1 结合以后，具有促进动脉粥 样硬化的形成和影响动脉粥样硬化斑块的稳定性的作用。此外，FKN 在原发性和继发性肾脏疾病等多种炎症性疾病中表达增加并发挥重 要作用，但目前尚无动脉粥样硬化性肾动脉狭窄炎症性肾损害与FKN 相关性报道。抗高血压药物具有降低动脉压，减少靶器官损伤的作用， 但其在动脉粥样硬化性肾动脉狭窄中的应用尚存在争议，它是否具有 减轻炎症性肾损害的作用及对Fractalkine 和CX3CR1 的干预作用值 得我们进一步研究。为此，我们通过复制动脉粥样硬化合并肾动脉狭 窄动物模型，测定血清肌酐值、血浆肾素活性（PRA），观察狭窄侧肾 脏炎症趋化因子FKN 及其受体CX3CR1 的分布，测定其量的变化，探 讨Fractalkine-CX3CR1 与动脉粥样硬化炎症性肾损害之间的相关性 及直接肾素抑制剂阿利吉仑、Ang II 受体抑制剂厄贝沙坦、钙通道 阻滞剂氨氯地平对其损伤性的干预作用，为动脉粥样硬化性肾动脉狭 窄肾损害的提供新的治疗靶点。 方法：1、复制动脉粥样硬化合并肾动脉狭窄动物模型： SD 大鼠随 机分为1K1C 组、2K1C 组及假手术组，平行针灸针缩窄法建立1K1C、 2K1C 模型后予注射VitD3 +高脂喂养10 周。2、阿利吉仑、厄贝沙坦、 氨氯地平对动脉粥样硬化合并肾动脉狭窄大鼠抗炎症性肾脏的保护 作用:分别予生理盐水、阿利吉仑、苯磺酸氨氯地平、厄贝沙坦灌胃 4 周后处死大鼠，分几个部分进行如下实验：（1）采集血液，然后生 化分析仪测定血肌酐值，放射免疫法测定PRA；（2）取SD 大鼠狭窄 侧肾脏，一部分石蜡包埋做PAS 染色；一部分-70℃冷冻保存；（3） 免疫组织化学法检测Fractalkine 及其受体CX3CR1 的表达：取狭窄 侧肾脏石蜡切片，采用SABC 法，分别检测Fractalkine、CX3CR1 在 狭窄侧肾脏的表达变化，黄色区域视为阳性，Image-pro plus6.0 软 件分析图像；（4）RT-PCR 法检测Fractalkine mRNA 及CX3CR1 mRNA 的表达：取冷冻保存的肾脏组织经RNA 提取、逆转录、PCR、电泳， Quangtity one 软件分析条带灰度值。 结果：1、各组大鼠药物干预后血压变化情况：各组SD 大鼠在药物干 预四周后，在同种造模方式下，药物干预组较生理盐水组血压