APC蛋白、GSK3β在吸烟小鼠气道上皮损伤修复中动态变化.pdfVIP

生理学报 Acta Physiologica Sinica, June 25, 2006, 58 (3): 255-261 255 研究论文 APC 蛋白、GSK3β 在吸烟小鼠气道上皮损伤修复中的动态变化 * 刘明阁，李娜萍 ，吴人亮，马 燕，洪渊智，田 丹，朱 敏 华中科技大学同济医学院病理学系，卫生部呼吸系疾病重点实验室，武汉 430030 摘　要： 为了探讨结肠腺瘤性息肉病(adenomatous polyposis coli, APC)蛋白、糖原合成酶激酶3β (glycogen synthase kinase 3β, GSK3β)在吸烟致气道上皮细胞(airway epithelial cell, AEC)损伤修复中的作用，本实验建立了吸烟导致AEC 损伤修复的 小鼠模型，采用HE 染色、免疫组织化学染色、免疫荧光共聚焦成像和Western blot 方法，观察损伤修复过程中APC 蛋 白、GSK3 β 在AEC 中表达及分布的动态变化。结果显示：(1) 随着吸烟时间延长，AEC 形态学上呈现损伤(1 、4 周) 、修 复(8 周) 、再损伤(12 周) 的变化。 (2) 免疫组化染色显示：AEC 中APC 蛋白表达在吸烟1 周时较对照组明显增强，4 周时较 对照组明显减弱，8 、12 周时均较4 周时增强但与对照组无差异；对照组GSK3 β 表达较强，吸烟组表达较对照组均减弱。 Western blot 检测小鼠肺组织中APC 蛋白、GSK3 β 的表达变化与免疫组化结果一致，磷酸化GSK3 β (p-GSK3 β)在吸烟组 的表达较对照组均有不同程度增高，尤以吸烟1 周时明显。 (3) 荧光共聚焦成像显示：对照组APC 蛋白在AEC 胞质内均匀 分布，吸烟1、8 周时APC 蛋白定位发生改变，呈簇状聚集于AEC 腔面和侧面质膜下；GSK3 β 在对照组和吸烟组AEC 胞 质内均匀分布，无定位改变。由上述结果可见，吸烟致小鼠AEC 损伤修复过程中APC 蛋白表达及在胞质内分布呈动态变 化，同时伴有GSK3 β 表达下调和磷酸化水平增高，提示二者可能通过参与修复过程中细胞迁移、分裂增殖等活动，在气 道上皮损伤修复过程中发挥重要作用。 关键词： 结肠腺瘤性息肉病蛋白；糖原合成酶激酶3 β ；吸烟；气道上皮； 损伤修复 中图分类号：R5 60 .2 Dynamic changes of adenomatous polyposis coli protein and glycogen synthase kinase 3β in the repair of the injured airway epithelial cells in smoking mice * LIU Ming-Ge, LI Na-Ping , WU Ren-Liang, MA Yan, HONG Yuan-Zhi, TIAN Dan, ZHU Min Department of Pathology, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology; Pulmonary Disease Laboratory, the Ministry of Health of China, Wuhan 430030, China Abstract: To investigate the roles of adenomatous polyposis coli (APC) protein and glycogen synthase kinase 3β (GSK3β) of smoking murine model in the repair of the injured airway epithelial cells (AECs) in different stages, 30 male Kun-Ming mice were randomly divided into two groups, the control group and the smoking group. There were 24 mice in smoking group, and 6 animals were separately killed at the end