四肢的发生分析.ppt

四肢的发生 器官发生 概述 脊椎动物四肢发育是发育生物学研究中器官发生的一个经典图式系统 解剖结构上具有明显的3个轴 在远近轴上形成近、中、远3段 前后轴结构容易区分，实验结果容易观察 发育的自我维持系统，剧烈的实验影响，对胚胎其他部分的影响较小，不会危及胚胎的生存 其他器官的图示发育规律在肢体发育过程中同样发挥作用 第一节 肢芽的形成 一、肢体区得出现及其位置决定 肢体区：肉眼可见肢芽出现以前，沿体轴两侧已经存在四个特定的圆形区域 特点：再生能力强、成对排列在体中线两侧 位置：前肢发生于第一胸椎平面，后肢发生于末节腰椎平面 决定基因：由hox基因家族中一系列hox基因的嵌套式表达直接决定（如前肢有关的hoxc6和hoxa6基因，视黄酸） 基因诱导形成的结构：顶端外胚层脊和极性活化区 二、肢体发育的启动 人胚发育至26d左右出现前肢芽，后两天出现后肢芽 鸡胚发育至第15-20对体节时，肢芽开始发生 肢体区侧板中胚层和体节间充质细胞增殖，形成半圆形凸起（肢芽） 启动信号：间介中胚层组织（通透性膜隔绝和移植实验） 侧板中胚层间充质细胞分化为肢体的骨、软骨、肌腱、韧带和筋膜，体节间充质细胞形成肌肉 移植实验表明：肢芽间充质细胞具有诱导肢体形成能力，而外胚层不具有诱导肢体形成能力，仅对肢体形成的信息作出反应的应答能力（仅限于胚胎背腹交界处的外胚层）。 诱导过程 间介中胚层提供侧板中胚层肢芽启动信号，侧板中胚层开始分泌FGF10，FGF10对肢芽的发育、启动和维持是必要和充分的（移植实验） FGF10不改变肢体形成类型（位置决定肢体类型） 三、肢体类型的决定 大多脊椎动物前后肢在形态和功能上存在明显区别 Hox基因激活肢体发育和肢体类型，如4个hox基因簇在发育的肢芽中表达，hoxa和hoxd在肢芽远端表达，沿肢芽远近轴和前后轴建立各部分位置信息；hoxb和hoxc在肢芽进端表达。 Hoxc4和hoxc5前肢表达，hoxC9、hoxc10、hoxc11仅在后肢表达，hox5在前肢定位中发挥重要作用（敲除则前移），hox基因启动决定前后肢类型的基因。 Tbx基因簇是决定前后肢不同发育类型的重要基因，tbx5在前肢表达，tbx4在后肢间充质细胞中表达 Pitx1基因是另一个决定肢体类型的基因，仅在后肢表达，可增强tbx4的表达 第二节 肢体远近轴的图式形成 一、顶端外胚层嵴的形成 顶端外胚层嵴（apical ectodermal ridge，AER）：肢体获得启动信号后，肢体区的间充质细胞开始增殖并分泌FGF10，FGF10能诱导肢芽外胚层在背腹交界处形成一个增厚的特殊结构（信号中心） 只有背腹交界处的外胚层才能对FGF10产生应答（通过radial fringe和engrailed1之间的相互抑制来实现） AER功能： 1、使其下方的间充质细胞不断增殖，同时具有可塑状态，肢芽沿远近轴方向延长 2、维持使肢体产生前后轴差异的信号分子在肢芽间充质的特定区域内表达 3、与决定肢体前后轴和背腹轴的信号共同作用，赋予肢芽内的每个细胞以特定的分化信息 二、AER介导肢体发育中不同胚层间的相互诱导作用 肢芽形成启动后，间充质细胞开始增殖，同时分泌FGF10，诱导肢芽外胚层AER形成、分泌FGF8和WNT3A。FGF8诱导肢芽后部间充质分泌SHH，SHH诱导AER后半部分泌FGF4。FGF8和FGF4促进间充质细胞增殖和诱导间充质后半部分shh基因的表达。AER分泌的WNT3A诱导beida-catenin在肢芽顶端和AER的积累，FGF8的活性依赖beida-catenin的存在。 FGF10能够诱导鸡胚背腹交界处的外胚层形成AER。在背部化的肢芽突变体中，由于没有背腹交界，便不能形成AER。 三、肢体远近轴图式的形成依赖于渐进区的发育 肢体的发育是通过AER与其下方的肢芽间充质的相互作用来实现的。 AER移植实验 表面切除，远端部分丢失 移植到正常的肢芽-额外的肢体沿远近轴方向生长 AER只有肢芽延长信息，没有决定肢体类型的信息（间充质细胞移植实验） 渐进区：AER分泌的信号分子促进肢芽间充质细胞增殖，仅限于AER下方200微米的范围，肢芽间充质细胞在这个区域不断增殖并保持未分化状态 特点：渐进区远端间充质细胞不断增殖，沿远近轴延伸，近端间充质细胞退出渐进区，停止分裂，开始分化。 建立肢体远近轴的信息来源于肢芽间充质渐进区细胞发育程度，细胞分裂次数决定了该细胞在远近轴上的位置（不同发育时期间充质细胞的移植实验） 四、决定肢体远近轴的hox基因 Hox基因簇在胚胎躯干的套嵌式表达，决定了躯干的前后轴模式，也决定了肢体发生位置 Hoxa13和hoxd13决定前肢最