丁羟甲苯、烟酰对紫外线抑制细胞免疫的保护作用.pdfVIP

中文摘要 前 言 臭氧层破坏是当今世界重大环境问题，目前围绕紫外线气候 变化引发的一系列健康危害倍受国际社会关注，过量紫外线可致 使机体免疫受到抑制，降低免疫系统对抑制癌症发生的监督作用， 故此，有关紫外线引起机体免疫抑制的作用已成为环境医学领域 中的重要课题。当机体皮肤接受过量的紫外线照射后，表皮郎格罕 斯细胞数量减少，抗原呈递功能受到抑制，不能触发T细胞应答。 紫外线致癌是一个复杂过程，其作用机理尚未完全明了，近年来， 活性氧的研究发展迅速。研究表明，活性氧参与很多病理过程，在 紫外线照射下，表皮细胞可产生单线态氧、H：O。、羟自由基等，能 使DNA的8一羟基鸟甙(8一OHdG)等受到损害，是活性氧抑制紫外 线免疫过程的分子机理。本研究旨在探讨抗氧化剂丁羟甲苯 (Bytylated 在紫外线诱导的免疫抑制中的拮抗作用，进一步阐明紫外线对皮 肤免疫抑制的作用机理，为开发研制出更有效的抗氧化剂提供科 学依据。 ， 材料与方法 { {本实验分别在短期及慢性UV照射条件下，以与肿瘤免疫监 视机制有直接关联的迟发性免疫反应强度及参与此细胞免疫反应 的LC数量、脾脏T细胞、腹腔巨噬细胞功能为指标，观察抗氧化 剂BHT、Nie对UV暴露引起的免疫抑制的保护作用。 1．迟发性过敏性反应(DelayedTypeHypersensitivity， DTH)强度检测：由专人观察过敏反应，并用游标卡尺测量小鼠耳 部皮肤厚度。以厚度为衡量DTH反应强度的指标。 2·郎格罕斯细胞(Langerhans cell，LC)检测：小鼠耳、背部表 7)片段相结 皮与IgG单克隆抗体OX。及FITC一山羊IgG的F(ab 合，用落射式荧光显微镜计数。 3．脾脏T细胞增殖功能测定(ConA刺激淋巴细胞转化实验 的增殖功能。 4)小鼠腹腔巨噬细胞(PeritonicMacrophage，PM)吞噬功能 测定(中性红法)：比色定量PM吞噬中性红的量(ODsto值)。 实验结果 一、短期UV照射条件下Nic、BHT对UV致细胞免疫抑制 的保护作用 1．各组DNFB激发前与激发后24小时耳缘厚度变化比较： 除正常对照组、阳性对照组外，其它各组激发后24小时耳缘厚度 均高于激发前，且有显著性差异，P0．01。说明单纯DNFB诱导 可引起明显的DTH反应。阳性对照组紫外线照射明显抑制了 DTH反应，而Nic、BHT减弱了紫外线的免疫抑制作用。 2．不同处理组小鼠耳、背部LC数比较：诱导组与正常对照 组相比，二者耳部、背部LC数无显著性差异。阳性对照组耳部、背 部LC数低于单纯诱导组，二者有显著性差异，PO．01。Nic组、 BHT组耳部、背部LC数低于单纯诱导组，有显著性差异，P 0．01。Nic组、BHT组耳部、背部LC数高于阳性对照组，有显著性 差异，PO．01。 3．各处理组腹腔巨噬细胞吞噬功能比较：正常对照组腹腔巨 噬细胞吞噬功能高于阳性对照组，但无显著性差异。Nic组、BHT 组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能高于单纯诱导组(P0．Ol； 0．05)。Nic组、BHT组腹腔巨噬细胞吞噬功能高于阳性对照组(P 0．01；0．05)。 ·2· 4．各处理组脾脏T细胞增殖功能比较：阳性对照组小鼠脾脏 T细胞增殖功能低于单纯诱导组。有显著性差异，PO·01。BHT 组高于单纯诱导组。有显著性差异，P0．01。Nic组、BHT组脾脏 T细胞增殖功能高于阳性对照组，有显著性差异，PO．01。 二、慢性uV照射条件下，Nic、BHT对UV抑制细胞免疫的 保护作用 1．各处理组耳部LC数比较：正常对照组、BHT组无论雌雄 耳部LC数均显著高于阳性对照组。有显著性差异，P0．01。Nic 组雌性耳部LC数高于丙酮对照组。有显著性差异，PO．Ol。 2．各处理组背部LC数比较：BHT组背部LC数高于阳性对 照组。有显著性差异，PO．Ol。Nic组雌性背部LC数高于丙酮对