体外诱导淋巴细BPDE-DNA加合物水平与19q13区域基因型与单体型的关联性研究.pdf

·中文论著摘要· 域基因型与单体型的关联性研究 刖 吾 癌症是严重危害人类健康的公共卫生问题，其发生发展是遗传和环境因素综 合作用的结果，找寻有效的遗传生物学标志，做到早期预防和合理治疗，对于提 高恶性肿瘤的生存率和生存质量具有重要意义。单核苷酸多态性被称作第三代遗 传学标记，其在人类基因组中并不是随机分布的，如果连锁不平衡程度较高，则 可能出现SNPs在单个区域中的结构模式，即单体型。环境应答基因SNP及单倍 体型作为目前复杂疾病重要的生物学标志，成为肿瘤易感及预后治疗研究的热点。 DNA修复基因是与肿瘤相关的首要环境应答基因。核苷酸切除修复NER是 DNA损伤修复系统中最重要而灵活的一种，对多种DNA双螺旋损伤变性，如多 环芳烃、铂类介导的DNA加合物，NER发挥主要的切除修复作用，而该通路的 DNA修复酶多态将决定个体的DNA修复能力，成为肿瘤易感及化学治疗个体差 异的主要原因。切除修复交叉互补因子1基因(ExcisionCross Repair Complemention D基因(ExcisionCross Repair Complementiongroup2／XcrodcrmaPigmentosum group 统的DNA损伤修复能力，与肿瘤发生发展及预后治疗关系密切。ERCCl基因存在 3’非编码区。ERCC2／XPDShIP研究主要集中在 C8092A(rs3212986)位于ERCCl 今尚无明确结论，详细机制仍有待进一步阐明。 煤、烟草和其它一些有机化合物高温加热或燃烧不完全时产生。7，8．二羟．9，10． 环氧苯并芘(BPDE)是苯并(a)芘在体内经微粒体酶代谢活化后生成的终致癌物， 其中反式BPDE是代谢产物中活性最强的，具有亲电性碳原子活性基团，能与核 酸和氨基酸中亲核基团共价结合形成加合物，损伤生物大分子的结构和功能，可 导致碱基突变、缺失、插入、交联、甚至是DNA断裂等后果，BPDE．DNA加合 物既可作为接触(暴露)生物标志，反映致癌物到达靶位的实际接触剂量，又可以作 为一种效应标志物，反映DNA受到的损伤效应，为癌症风险评估提供重要信息。。 本研究以818例沈阳地区健康汉族人群为研究对象，随机抽取282例通过高 效液相色谱精确定量的体外培养淋巴细胞与BaP作用产生的BPDE-DNA加合物 1615)， C8092A(rS3212986)；ERCC2／XPD 基因型及单体型的关联，从而找寻意义确切的肿瘤易感生物标志。 研究方法 1．研究对象的确定 从2010年10月至2011年5月，收集来自沈阳市第九人民医院体检中心的中 国汉族成年健康人群818例，填写简单调查问卷：记录人口学特征、既往病史、 家族史及生活方式(吸烟、饮酒)等一般状况。研究对象排除肿瘤、遗传性疾病、 放化疗、重度感染等疾病。告知研究对象并签署知情同意书后实施研究计划。 2．血液样品采集 每一研究对象平稳采集8IIll外周静脉血样：其中6ml抗凝用于外周血淋巴细 胞分离； 2ml抗凝用于常规提取DNA。 3．BPDE．DNA加合物水平测定 将随机抽取的282例提取的淋巴细胞与苯并(a)芘(BaP)孵育后，应用高效液相 色谱法测定BPDE．DNA加合物含量 2 4．ERCCl和ERCC2／XPD基因多态性的分析 4．1 ERCC2／XPD SNP位点基因型； 4．2ERCCl和ERCC2／XPDSNP基因型在人群中的分布频率； 4．3 单体型区域 5．BPDE．DNA加合物水平与ERCC 体型的单因素及多因素分析。 结 果 析 ERCCl R2=0．036)。 2．BPDE．DNA加合物水平与研究人群基本特征的关联性分析 具有统计学意义(PO．05)。与无饮酒吸烟史的人群相比，随饮酒与吸烟年的增 加，加合物含量有所上