热应激蛋白70原检测试剂盒的研制与应用.pdfVIP

竺主型垫查堂塑堕堕兰堕 一—————————————堡兰里茎!!!鱼兰 热应激蛋白70抗原检测试剂盒的研制与应用 学位申请人 何启强 导 师： 邬堂春 教授 杨少杰 教授 ， 摘 要 r ，≮ f1』目的 V HSP70参与细胞热耐受和其他应激耐受的形成。人体HSP70水平的高低可以反映个体热适应能 力的强弱，并可用来评价机体受到职业性有害因素危害的程度。通过研制HSP70抗原检测试剂盒， 测定机体细胞HSP70的表达水平，以探讨其作为评价人群应激程度、应激能力、健康状况指标的可 能性，并为预防高温及职业性毒物危害提供科学依据。 r，、 犯．-材料和方法 u采用重塑婴i叁壹藩，在大肠杆菌GJIl68中诱导表达HsP70抗原，并以此抗原免疫家兔，获得兔 抗血清。通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆HSP70。 f 3．结果 ．． ＼ 最佳条件：各试剂的最适浓度分别是：包被抗体抗HSP70单克隆抗体(北京中山生物技术公司)的 浓度为0 最小检出限、精确度、回收率：本试剂盒的最小检出限为5．5ng／ml，标准曲线在12．5～100．0ng／ml 范围内线性良好。3份血浆标本分别同批重复8次测定，平均批内变异系数为7．6％；3份血浆6次不 同批重复测定，平均批间变异系数为12．7％。向血浆中加入已知量的标准抗原，测得平均回收率为 851596。 、／， R 14．J结论 。 本试剂盒检测珏￡￡2Q拭厦的可测范围广，灵敏度较高，变异系数较小，表明其灵敏、特异、可 靠、重复性好。经初步应用，所测得的20．0-M3．9岁健康男性血浆HSP70的浓度为151．0-2：13．8ng／ml。 关键词 V 热应激蛋白／70；抗原检翌笋剂盒；酶联芝多熙附实验 √ √。 堂±型垫查堂旦堕墨堂堕 一堡主!壅兰!!兰 HSP70 of A of akitfordetection developing Study its and application preliminary ofMaster’Sin He Candidate DegreeMedicine：Qiqiang Wu Tutors：Prof Tangchun Prof Yang Shaojie 0bjeetive toheatanda ofothor