钩端螺旋体Li A基因的原核表达及抗原性分析.pdfVIP

A蛋白的原核表达及抗原性分析 钩端螺旋体Lig 研究生：李国波 导师：吴小南教授 中文摘要 目的：钩端螺旋体病作为全球范围内一个重要的公共卫生问题，防治工作越 来越引起公众的关注。寻找灵敏、特异性良好的抗原，对于国内钩体感染的早期 诊断有很大帮助。通过基因工程方法，获得表达量高、抗原性好的钩端螺旋体重 组抗原，检测国内常见的15群15型钩端螺旋体阳性标准血清，初步验证其抗原 性。 方法：用PCR法扩增哥本哈根型钩体LigA基因，与表达载体pET-30a连接， 经亲和层析纯化后，采用westernblot和ELISA分析其抗原性。 结果：通过原核表达可以获得高产量的重组蛋白，westernblot和ELISA结 果显示重组抗原在检测国内常见的15群15型钩端螺旋体阳性标准血清方面具有 良好的免疫活性。 结论：可以通过原核表达哥本哈根型钩体LigA基因，获得的重组蛋白可应 用于钩体病血清抗体的检测，在钩体病诊断及疫苗研究中具有潜在的应用价值。 关键词：钩端螺旋体LigA基因基因表达抗原性 4 英文摘要 Title： ’ OIof AAeneene expressloneotosplra Prokaryotic． LeptostLig ■ · ● n．． ·■ ■ ■‘ and oIits analySlSantigeniclty Guobo Postgraduate：Li Xiaonan Supervisor：Prof．Wu isa health inthe moreand Objective：Leptosirosismajorpublic problemworld，and moreattentionis onits findsensitiveand work．Thus，to paid prevention specific canoffermuch fordomestic of infection． earlydiagnosis antigens help leptospirosis the of whichisobtainedfrom Toevaluate LigAprotein antigenicity Leptospira strainand inKcoli methods，and Copenhagenexpressedbygeneticengineering using 15standard seraof todetect positive domestic LigAprot