铁皮石斛组培课件.pptVIP

铁皮石斛;班级：农学121 学号：1251506104 姓名：陈旺有;铁皮石斛;铁皮石斛(Dendrobium officinale)是兰科(Orchidaceae)石斛属(DendrobiumSw．)多年生草本植物。铁皮石斛为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。铁皮石斛是传统名贵中药材，有生津益胃、清热养阴和清咽利嗓等功效，主要药用成分石斛多糖是一种免疫调节剂。铁皮石斛蒴果成熟时易开裂，且种子粒径小，自然繁殖率低。为了保护和有效利用铁皮石斛，通过组织培养技术大量快速繁殖铁皮石斛组培苗显得尤为重要。 ;铁皮石斛的用途： ???? 铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo），为兰科石斛属多年生草本植物，分布于气候温润的南方山区，附生在半山腰阴湿岩缝、老树表皮，生存温度为–5℃～36℃，生长温度为15～30℃。其茎枝富含石斛多糖、甘露糖、氨基酸、微量元素、菲类化合物等成分，具有提高免疫、增强记忆、延缓衰老、防治眼病、保护嗓子、降压降糖、防癌抗癌、抑制血栓形成等作用。铁皮石斛口感清香、淡甜、细滑，耐人寻味，人们往往直接嚼食、泡茶饮用、烹调美味滋补药膳。现阶段被制成口服液、颗粒剂、软胶囊等服食。铁皮石斛枝叶奇特、花型秀美，极具观赏价值。道家经典《道藏》把铁皮石斛、天山雪莲、三两重人参、百二十年首乌、花甲之茯苓、苁蓉、深山灵芝、海底珍珠、冬虫夏草列为中华九大仙草，而铁皮石斛被冠以九大仙草之首，因而成为历代宫廷贡品，为历年版《中华人民共和国药典》所收载。 ;??? 市场现状： ???? 全国中药资源普查显示，铁皮石斛鲜品的市场年需求量在万吨左右，且每年递增15%。鲜品收购价每公斤在1000元以上，加工成铁皮枫斗后每公斤销售价达18000元，是石斛属植物中最名贵的物种。但铁皮石斛自然繁殖能力极低，疯狂的采挖导致野生资源日见稀少，被国家列为二级濒危保护植物。目前，人工繁育种植技术趋于成熟，但主要集中在少数企业运作，投资成本高，种植面积少，其产量难以满足市场需求，混淆品充斥市场。;;组培材料及方法 一是铁皮石斛成熟种子，二是1年生铁皮石斛植株茎段。 取铁皮石斛成熟蒴果，在超净工作台上用刀片将其剥开，将种子倒在无菌滤纸上并用无菌镊将其包好，放在无菌瓶中用75%的酒精消毒30 s，0.1%的 HgCl2消毒3~4 min后，用无菌水冲洗5~6次，用镊子把滤纸夹出，打开，把种子播在无菌培养基表面。约20天后，发芽而又未被污染的小苗，即为建立的无菌系，用于进一步进行试验。 从1年生铁皮石斛植株上选择生长健壮的茎段，摘去叶片和膜质叶鞘，剪成约2 cm长带节的小段，用洗洁剂清洗后置流水下冲洗20~30 min。在超净工作台上用 75%的酒精消毒 30 s，0.1% HgCl2灭菌 5 min后，用无菌水冲洗5~6次，放入垫有干无菌滤纸的培养皿中，以吸去多余水分，茎段两端各切去0.2~0.3 cm，插入备好的无菌诱导培养基中，每瓶培养基插1个外植体。;不同阶段培养基备注 愈伤组织（原球茎）的诱导MS+2.0mg/L 6-BA+3%蔗糖+0.8%琼脂pH=5.8 原球茎的增殖MS+20%马铃薯+3%蔗糖+0.8%琼脂pH =5.8 原球茎的分化MS+20%马铃薯+2.0mg/LNAA+3%蔗糖+0.8%琼脂pH=5.8 幼株的生根壮苗MS+10%香蕉+2.0mg/LNAA+3%蔗糖+0.8%琼脂pH=5.4-5.6;（1）外植体诱导培养基。 培养基：MS+BA 0.0~2.0 mg/L（单位下同）+NAA 0.1~2.0 mg/L； 培养基：MS+BA 0.0~2.0 mg/L+IBA 0.1~2.0 mg/L； 培养基：MS+BA 0.0~2.0 mg/L+IAA 0.1~2.0 mg/L。 （2）增殖培养基。 培养基：MS+BA 0.2~2.0 +NAA 0.1~2.5+土豆汁10%~50%。 培养基：MS+BA 0.2~2.0 +NAA 0.1~2.5+香蕉汁10%~50%。 （3）生根培养基。 培养基：1/2MS+NAA0.0~2.5+土豆汁10%~50%+活性碳 0~10‰； 培养基：1/2MS+NAA0.0~2.5 mg/L+香蕉汁20%+活性碳 0~10‰ （4）其他培养条件。 所有培养基中添加蔗糖3%，卡拉胶6.8 g/L，pH值5.2~5.6。培养温度 23~25℃，光照强度2000 lx，光照时间10 h/d。;灭菌 1培养基灭菌 1）检查灭菌锅的水位、电源、排气阀、排气管、安全阀以及压力表，确保灭菌锅各指标和功能的正常，以防事故发生； 2）把带灭菌的培养基装入锅内，盖上锅盖，对称而均匀地扭紧螺丝； 3）打开电源和排气阀，调节电压至220V； 4）待排气阀排除水蒸气30s—1min后，关