慢性温与非预期应激加重斑秃模型小鼠脱毛及机制的探讨.pdfVIP

慢性温和非预期应激加重斑秃模型小鼠脱毛及其机制的探讨 中文摘要 中文摘要 目的：斑秃是一种常见的脱发疾病，其发病机制尚未完全阐明，但研究表明 斑秃疾病的发生发展可能涉及免疫、微循环、精神心理等多种因素。本实验第一 部分是运用人工合成的小分子干扰素诱导剂咪喹莫特，利用其免疫修饰的作用来 制备斑秃小鼠模型。实验的第二部分是在斑秃模型的基础上，对实验小鼠进行慢 性温和非预期性应激，并采用扩血管药前列地尔，利用其改善微循环的作用来干 预慢性温和非预期性应激的影响。目的是探讨慢性温和非预期应激在咪喹莫特诱 导斑秃模型过程中的作用及其分子机制，为斑秃疾病的心理干预提供新思路和实 验依据。 方法：1．采用咪喹莫特乳膏涂抹法建立C3H/HeJ 小鼠斑秃模型，与空白对照 组（Control 组）比较，观察咪喹莫特对小鼠皮肤组织的影响。2 ．将小鼠随机分为 空白对照组（Control 组）、咪喹莫特组（M 组）、咪喹莫特+慢性温和非预期应激 组（MS 组）、咪喹莫特+慢性温和非预期应激+前列地尔组（MSAL 组）。选取实验 开始前 1 天和第7、14、21 天对小鼠体重进行测量和拍照，实验结束后，对4 组 小鼠进行行为学评估、采集标本及检测血中促肾上腺皮质激素（ACTH ）的含量； 采用ELISA 试剂盒检测小鼠皮肤中干扰素γ （IFN-γ ）、肿瘤坏死因子α （TNF-α ） 的含量；采用血管内皮细胞标记物CD31 标记血管，并计算微血管密度（MVD ）； 采用免疫组织化学法检测小鼠皮肤中血管内皮生长因子（VEGF ）、碱性成纤维细 胞生长因子（BFGF ）的表达变化。 结果：1．以咪喹莫特涂抹法造模可见小鼠项部皮肤脱毛现象明显，呈斑片状， 检测其皮肤组织的免疫因子显示IFN-γ 和TNF-α 因子的含量增高，皮损特点与人 类斑秃具有相似性，可成功诱导斑秃模型。2 ．（1）MS 组和MSAL 组小鼠体重显 著低于 Control 组和 M 组小鼠 （P0.05 ），运动总距离和修饰行为次数显著少于 Control 组和M 组小鼠 （P0.05 ），而中央格停留时间显著多于Control 组和M 组 小鼠（P0.05 ），MS 和MSAL 组小鼠血清ACTH 含量显著高于M 组 （P0.05 ）， 提示慢性温和非预期应激成功模拟应激反应。（2 ）实验结束时，同Control 组相比， I Abstract The mechanism of alopecia areata model mice aggravated by chronic mild unpredictable stress M 组、MS 组和MSAL 组小鼠毛发均发生不同程度的脱落， MS 组与MSAL 组严 重程度近似，M 组较轻；M 组、MS 组和MSAL 组小鼠皮肤组织中出现大量炎性 细胞聚集，Control 组小鼠只有少量或者没有出现。（3 ）与Control 组相比，M 组、 MS 组和MSAL 组小鼠皮肤组织中IFN-γ 与TNF-α 含量显著增高 （P0.05 ），MS 组和MSAL 组小鼠皮肤组织中IFN-γ 与TNF-α 含量显著高于M 组 （P0.05 ）。（4） 和Control 组小鼠相比，M 组、MS 组和MSAL 组小鼠皮肤组织中的血管密度显著 P0.05 ）；和M 组小鼠相比，MS 组皮肤组织中的血管密度显著降低（P0.05 ）； 降低（ 和MS 组相比，MSAL 组小鼠皮肤组织中的血管密度显著增高 （P0.05 ）。（5）和 Control 组小鼠相比，M 组、MS 组和MSAL 组小鼠皮肤组织中VEGF 和BFGF 的 免疫组织化学染色得分显著降低 （P0.05 ）；和M 组小鼠相比，MS 组小鼠皮肤组 织中VEGF 和BFGF 的免疫组织化学染色得分显著降低（P0.05 ）；和MS 组相比， MSAL 组小鼠皮肤组织中VEGF 的免疫组织化学染色得分显著增高 （P0.05 ）。 结论：1．外用咪喹莫特可以引起毛发脱落，显示成功建立小鼠斑秃模型。2 ．慢 性温和非预期应激能较好地模拟机体应激反应。3 ．慢性温和非预期应激加重斑秃 模型小鼠的毛发脱落，促进了小鼠皮肤组织免疫的进一步紊乱。4 ．慢性温和非预 期应激