新细胞与分子实验操作指南.docVIP

中药复方研究室细胞与分子实验操作指南 （2007.10） 目 录 第一章 细胞实验操作 3 第一节 细胞培养常用耗材与设备 3 第二节 无菌操作 3 第三节 培养用品的清洗 5 第四节 培养用品的消毒灭菌及灭菌锅的使用 6 第五节 常用缓冲液、胰蛋白酶消化液及培养基的配制 8 第六节 细胞培养、换液、消化传代 11 第七节 细胞计数 13 第八节 细胞复苏与冻存 15 第九节 MTT法测定细胞活力或细胞增殖 16 第二章 分子实验操作 17 第一节 PCR引物设计与实验操作 17 第二节 Western blot 实验操作 25 第三节 Flow cytometry实验操作 31 第一章 细胞实验操作 细胞培养常用耗材与设备 准备室中常见耗材与设备 去离子水制备器、酸缸、烘箱、高压灭菌锅、储备柜（放置干净未消毒的物品）。 容量瓶（500 ml，1L）、锥形瓶（500 ml，1L）、磁力搅拌器、pH计、电子精密天平、台式离心机、冷冻离心机、涡旋器、普通冰箱（4℃，-20℃）、超低温冰箱（-70℃）。 细胞培养瓶（25mm2，75mm2 ，175mm2）、细胞培养板（96-well，24-well，12-well，6-well）、细胞培养皿（35mm，60mm）、细胞冻存管（2ml，5ml）、离心管（10ml）、移液管（2ml，5ml，10ml）。