PRRSVRdRp、ORF3与ORF5基因原核表达及间接ELISA方法建立.pdfVIP

摘 要 and 猪繁殖与呼吸综合征(PorcineReproductiveRespiratorySyndrome，PRRS) 是20世纪80年代末发现的一种高度传染性疾病，能引起妊娠母猪的流产、死胎、木 乃伊等繁殖障碍症状，以及各种年龄猪(特别是仔猪)的呼吸道症状。PRRSV感染能降 低猪体免疫力，常引起其他病原微生物的继发或并发感染，加重病情。该病在世界许 多国家和地区的广泛流行，已经造成了巨大的经济损失，严重影响着世界养猪业的发 展。我国自1995年爆发此病以来，现已成为规模化猪场引发猪繁殖障碍和呼吸道疾 病的主要病原之一．特别是这两年爆发的高致病性蓝耳病，更是对国内的养猪业造成 了沉重打击。为了更有效的预防和控制PRRSV的爆发，本研究对PRRSV的非结构蛋白 PRRSV抗体的间接ELISA方法，结果如下： RdRp、 到了约为720bp、585bp和498bp大小的目的片段。 1中，用IPTG 诱导表达，分别得到分子量约为46KDa、42KDa和38KE!a重组蛋白。 3、将大量诱导表达重组蛋白，利用His-Bind蛋白纯化试剂盒进行纯化，以纯化后的 重组蛋白作为诊断抗原，通过对抗原浓度、血清浓度和血清作用时间等ELISA条 件的摸索，初步建立了一套检测PRRSV抗体的间接ELISA方法。 ORF5几个基因克隆及蛋白的原核表达和间接ELISA方法的初步研究。为进一步从分 子水平上对揭示PRRSV的非结构蛋白和结构蛋白的分子特征，为PRRSV分子流行病学 的研究提供理论依据，也为Pi氓SV的诊断及预防提供了新的物资材料和理论资料。 关键词：PRRSV；原核表达：间接ELISA ofGene andORF5ofPRRSV RdRp、ORF3 ProkaryoticExpression ofIndirectELISAMethods andTheEstablishment ^bstraot inthe Porcine and wasdiscovered Syndrome(PRRS)，which ReproductiveRespiratory late a infectiousdiseaseintheswine Porcine 1980’S，ismgmy species，causedby and oanlead RespiratorySyndromevmls(PRRSV)．PRRSto他pl硪tuc帆 Reproductive failuresinthe SOWsuchaslate—term increasednumberof farrowing abortions，an stillborn, mummifiedandweak·bom in ofall respiratoryproblemspigs ages(especially pigs,and