第十二章临床血液检验要点.ppt

S54型紫外分光光度计 UV8500型紫外分光光度计 比色杯（比色皿） 玻璃比色杯 石英比色杯 荧光比色杯 比色杯使用注意事项 1、拿取比色皿时，只能用手指接触两侧的毛玻璃，避免接触光学面,光玻璃面对着光路。2、不得将光学面与硬物或脏物接触。盛装溶液时，液面高于光路,高度为比色皿的2/3处即可，光学面如有残液可先用滤纸轻轻吸附，然后再用檫镜纸擦拭。3、测定时浓度由低到高，进行润洗。比色皿在使用后，应立即用水冲洗干净。必要时可用1：1的盐酸浸泡，然后用水冲洗干净。4、不能将比色皿放在火焰或电炉上进行加热或干燥箱内烘烤；5、在测量时如对比色皿有怀疑，可自行检测。 微量移液器 吸嘴装在吸液杆上，应套牢避免间隙。 依据所需容量旋转手轮，使数轮显示所需值。 轻轻地将推动按钮下压，使推动按钮推移至第一停点位置。 手持取液器垂直浸入溶液中，吸嘴浸入深度为2-4mm，停留2-3秒后缓慢放松按钮，即回到原来位置，溶液吸入后稍停即可将吸嘴移出液面。 将取液器吸嘴置于排液容器内。使吸嘴尖紧贴容器内壁，按压推动按钮至第二停点位置，使溶液排尽，松开按钮。 移液完毕，按压卸嘴按钮，将吸嘴脱卸。 分光光度计的使用 722型分光光度计 样品测试操作 ① 打开电源开关，使仪器预热20分钟 ② 用“波长设置”按钮将波长设置在您将要使用的分析波长位置上 ③ 打开样品室盖，将参比溶液倒入比色皿中放入比色皿架靠近测定者一端位置，并将样品溶液倒入比色皿中放入比色皿架的其它位置，盖好样品室盖。 ④ 拉动比色皿架拉杆一小格使比色皿架挡住光路，按“0%T”键调透射比零 ⑤ 推入比色皿架使参比溶液位于光路中，盖好样品室盖，按“100%T”调100%透射比 ⑥ 按“方式键”（MODE）将测试方式设置为吸光度方式(A) ⑦打开样品室盖，将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中，盖上样品室盖 ⑧将参比溶液推入或拉入光路中，按“100%T”调A零 ⑨ 将被测溶液拉入光路中，此时，显示器上所显示是被测样品的吸光度参数 ⑩实验完成后，关闭电源，洗净比色皿，并盖好盖布。 光路 光路 血液葡萄糖测定(费吴氏法) 血液非蛋白氮测定 血清总蛋白、白蛋白及球蛋白测定（双缩脲法） 血清尿素测定（二乙酰-肟法） (一)血液葡萄糖测定(费吴氏法) 原理　无蛋白血滤液中的葡萄糖，具有还原性，与碱性高铜混合加热后，将高铜还原成氧化低铜而呈红色沉淀，此沉淀物再被磷钼酸氧化成蓝色物质。与同样处理的标准葡萄糖管比色，而求得血糖含量。 试剂 0.25％苯甲酸溶液 葡萄糖贮存标准液(1ml含10mg葡萄糖)? 葡萄糖应用标准液(1ml≌0.1毫克葡萄糖) 碱性铜溶液 磷钼酸试剂 10％钨酸钠溶液 1/3mol／L硫酸溶液 操作方法 钨酸钠法制备无蛋白血滤液50ml：取小烧杯或大试管一支，先加入蒸馏水7ml，再加入新鲜抗凝血1ml，充分混匀，使之溶血。然后，加入10％钨酸钠溶液1.0ml，混匀。最后，徐徐加入2／3N硫酸溶液1ml，随加随摇，充分混匀。放置5～10min后，用优质滤纸过滤或离心沉淀，即可获得无色清亮无蛋白血滤液以供备用。 ? 此法所得无蛋白血滤液近中性，不仅适用于葡萄糖的测定，还可用于非蛋白氮、尿素氮，肌酐等的测定。 ? 步骤 测定管 标准管 空白管 1 无蛋白血滤液（ml） 葡萄糖标准应用液（ml） 蒸馏水（ml） 碱性铜溶液（ml） 2 0 0 2 0 2 0 2 0 0 2 2 2 混合后，在沸水中煮沸8min，取出后浸于冷水中2-3min（不可摇动） 3 磷钼酸试剂 2ml 2ml 2ml 4 混合后，于室温下静置2min 5 蒸馏水加至 25ml 25ml 25ml 6 混匀，待管内二氧化碳逸出后比色，选用620nm滤光板比色，读取各管密度值 取血糖测定管3支，分别标明测定管、标准管及空白管，按表操作。 全血血糖含量（mg/100ml）＝测定管光密度/标准管光密度×0.2×100/0.2 临床 意义 增高 病理性增高 糖尿病、甲状腺机能亢进 肾上腺皮质机能亢进 暂时性增高 全麻后、肺炎、肾炎、 颅内压增高、中枢神经感染 缺氧窒息 减低 生理性减低 病理性减低 胰岛素分泌过多、严重贫血 肾功能衰竭的慢性肾炎及功 能减弱、甲状腺功能减弱、 脑垂休功能减退。 多见长时间的剧烈运动过后、 过分饥饿及哺乳期竺 (二)血液非蛋白氮测定 原理　血中的非蛋白氮物质主要