RNA干扰下调PPP2R5C对T-ALL TCR Vβ亚家族分布和克隆增殖的影响.pdfVIP

第35卷 第4期 暨南大学学报 (自然科学与医学版 ) Vo1．35 NO．4 2014年 8月 JournalofJinanUniversity(NaturalScience＆MedicineEdition) Aug． 2014 RNA干扰下调 PPP2R5C对 T-ALLTCRv13 亚家族分布和克隆增殖的影响 徐 艳 ， 陈 宇 ， 周玲玲 ， 刘思初 ， 杨力建 ， 陈少华 ， 罗更新。， 李扬秋 (暨南大学 1．再生医学教育部重点实验室；2．医学院血液病研究所，广东 广州510632； 3．第一附属医院 血液科，广东 广州510630) [摘 要] 目的：基于前期利用靶向PPP2R5C基因的小干扰 RNA(PPP2R5C-siRNA)抑制白血病T细胞增殖的结 果 ，进一步了解 PPP2RSC—siRNA对 T—ALL样本 中TCRv13亚家族基因谱 系及其克隆性增殖情况．方法：利用 PPP2R5C—siRNA转染2例初发未治疗T—ALL病人外周血单个核细胞 (PBMC)，设无关序列对照组 (sc)和空白对照 组 (Nc)；利用实时定量PCR检测 PPP2 c基因表达水平．利用 RT—PCR扩增各组样本 中24个TCRVB亚家族基 因的互补决定区3(CDR3)；阳性产物进一步经基因扫描分析 CDR3长度，了解其 VB亚家族T细胞克隆性．结果： PPP2RSC—siRNA处理后明显下调 PBMC中PPP2R5C基因表达水平．2例初发T—ALL外周血中分别可检测到 10和 l7个 Vp亚家族，多数 Vp亚家族 T细胞为多克隆性 ，病例 1中V3[9和 Vp17为寡克隆性，而病例2中，VI314和 Vp16呈寡克隆性 ；经过RNA干扰处理后 ，TCRVp亚家族表达率降低，仅检测到3和4个Vp亚家族，分别为v132， vl33，Vp16和Vp17．其中2个Vp家族的寡克隆性模式发生改变，病例 1中，V3[17转为多克隆，而病例 2中，VBl6 也转变为多克隆．结论 ：RNA干扰下调 白血病 T细胞 PPP2R5C基因表达抑制细胞增殖时，在一定程度上影响TCR Vp亚家族T细胞增殖和克隆模式变化，对正常T细胞功能可能存在一定影响． [关键词] JPPP2 c基因； 小干扰RNA；T细胞一急性淋巴细胞白血病；T细胞受体VB基因；T细胞克隆性 [中图分类号] R392．11；R733．71 [文献标志码] A [文章编号] 1000—9965(2014)04—0361—06 doi：10．11778／i．jdxb．2014．04．005 Influenceofdown-regulation ofPPP2R5C byRNA interference onthedistributionandclonalexpansionofTCRv13subfamilyin T cellsfrom patientswithT-ALL XUYah， CHENYu， ZHOULingling， LIUSichu， YANGLijian， CHEN Shaohua ， LUO Gengxin ， LIYangqiu ， (1．KeyLaboratoryforRegenerativeMedicineofMinistryofEducation； 2．InstituteofHematology，MedicalCollege，JinanUniversity，Guangzhou510632，China； 3．DepartmentofHematology，theFirstAffiliatedHospital，JinanUniversity，Guangzhou510630，China) [Abstract] Aim：Based on theresultsthatsmallinterferi